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H9c2(2-1)
Gewebe
Herz, Myokard
Synonyme
H9c2 (2-1), H9c2, H9C2

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H9c2(2-1)

Cell line · Artikelnummer 305203

H9c2(2-1) cells, derived from the ventricular myoblasts of embryonic BD1X rat hearts, are a subclone of the original H9 cell line established in the early...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

H9c2(2-1)-Zellen, die aus den ventrikulären Myoblasten embryonaler BD1X-Rattenherzen stammen, sind ein Subklon der ursprünglichen H9-Zelllinie, die in den frühen 1990er Jahren etabliert wurde. Bei diesen Zellen handelt es sich um immortalisierte Myoblasten, die häufig in vitro zur Untersuchung des Herzstoffwechsels, der Physiologie und der Pathophysiologie, einschließlich Ischämie, Hypertrophie und Apoptosemechanismen des Herzens, verwendet werden.

Phänotypisch weisen H9c2-Zellen Merkmale des Skelettmuskels auf, sind aber in der Lage, unter bestimmten experimentellen Bedingungen, wie z. B. einer durch Retinsäure oder andere Wirkstoffe induzierten Differenzierung, einen Herzmuskel-Phänotyp anzunehmen. Diese Flexibilität macht sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung des Verhaltens des Herzmuskels als Reaktion auf verschiedene physiologische und pharmakologische Stimuli. Genetisch gesehen sind H9c2-Zellen diploid, was ihre Verwendung in genetischen Studien erleichtert, bei denen die Aufrechterhaltung eines stabilen Karyotyps entscheidend ist.

Die Forschung mit H9c2(2-1)-Zellen hat wesentlich zum Verständnis der zellulären Reaktionen auf oxidativen Stress, mitochondriale Dysfunktion und die Schutzfunktion verschiedener pharmakologischer Wirkstoffe gegen Kardiotoxizität beigetragen. Diese Zelllinie ist nach wie vor ein Eckpfeiler in der Kardiomyozytenforschung, da sie ein reproduzierbares, kontrolliertes Modell zur Erforschung der komplexen biologischen und molekularen Mechanismen darstellt, die der Herzfunktion und den Herzerkrankungen zugrunde liegen.

Gewebe
Herz, Myokard
Synonyme
  • H9c2 (2-1)
  • H9c2
  • H9C2

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Myoblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
H9c2(2-1) (Cytion-Katalognummer 305203)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0286

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Acetylcholin, ausgedrückt
Proteinexpression
Myokinase, Kreatinphosphokinase, Myosin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
BDIx
Alter des Spenders
Embryo