C2C12

Bunková línia C2C12, imortalizovaná myšia myoblastová bunková línia odvodená zo stehenného svalu 2-mesačnej myši kmeňa C3H, sa vo veľkej miere využíva v biomedicínskom výskume pre svoje jedinečné diferenciačné vlastnosti. Bunky myoblastov C2C12 sa rýchlo množia a vykazujú typické vlastnosti myoblastov v podmienkach s vysokým obsahom séra. Pri prechode na podmienky s nízkym obsahom séra alebo pri hladovaní bunky C2C12 začínajú myogénnu diferenciáciu a menia sa na myotuby, ktoré sú prekurzormi kontraktilných buniek kostrového svalstva.

Bunky C2C12 ľahko inkorporujú exogénnu cDNA a nukleové kyseliny prostredníctvom transfekcie, čo z nich robí dobrú voľbu pre štúdie génovej expresie a výskumy diferenciácie myoblastov a myotub. Proces diferenciácie sa vyznačuje expresiou myogénnych markerov, ako sú Myf5, MyoD, Myogenin a Mrf4, spolu s markermi špecifickými pre svaly, ako sú Csrp3 a Mef2a, ktoré sú nevyhnutné pri štúdiu rôznych svalových fenotypov a regenerácie kostrového svalstva.

Jedinečný tvar myoblastov C2C12 a ich transformácia na myoblastové bunkové krúžky a následne na zrelé myotuby v médiu s prídavkom séra podčiarkuje dynamickú povahu týchto buniek a ich potenciál vo výskume kostrového svalstva.

Výskumníci používajú substráty, ako sú želatínové hydrogély pre bunkové kultúry C2C12, na simuláciu podmienok svalov in vivo, čo umožňuje podrobné štúdie vývoja svalových buniek a účinkov extracelulárnej matrice. Metabolické profilovanie odhaľuje kľúčové poznatky o dráhach zapojených do tvorby a obnovy svalov so zameraním na základné proteíny a úlohu vápnika pri kontrakcii. Techniky umlčovania génov ďalej osvetľujú proces diferenciácie a zdôrazňujú význam fosforylácie SMAD1 pri regenerácii svalov, čo je kľúčové pre pochopenie regenerácie pri ochabovaní svalov a zraneniach.

Celkovo možno konštatovať, že bunková línia C2C12 slúži ako rozhodujúci nástroj v oblasti biomedicínskeho výskumu a ponúka univerzálnu platformu na skúmanie zložitostí tvorby svalov, diferenciácie, expresie génov a hlbokého vplyvu rôznych faktorov na bunkovú líniu kostrového svalu vrátane kľúčovej úlohy myofilamentov, proteínov intermediárnych vlákien a celkového kontextu organizmu, v ktorom sa tieto bunkové procesy odohrávajú.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke