C2C12

C3H fare türünden 2 aylık bir farenin uyluk kasından elde edilen ölümsüzleştirilmiş bir fare miyoblast hücre hattı olan C2C12 hücre hattı, benzersiz hücre farklılaşma özellikleri nedeniyle biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. C2C12 miyoblast hücreleri yüksek serum koşulları altında hızla çoğalır ve tipik miyoblast özellikleri sergiler. Düşük serum koşullarına veya açlığa geçildiğinde, C2C12 hücreleri miyojenik farklılaşmayı başlatarak kasılabilen iskelet kası hücrelerinin öncüsü olan miyotüplere geçiş yapar.

C2C12 hücreleri, transfeksiyon yoluyla eksojen cDNA ve nükleik asitleri kolayca bünyesine katarak gen ekspresyonu çalışmaları ve miyoblast ve miyotüp farklılaşması araştırmaları için iyi bir seçim haline gelir. Farklılaşma süreci, farklı kas fenotiplerini ve iskelet kası rejenerasyonunu incelemek için gerekli olan Csrp3 ve Mef2a gibi kasa özgü belirteçlerin yanı sıra Myf5, MyoD, Myogenin ve Mrf4 gibi miyojenik belirteçlerin ekspresyonu ile işaretlenir.

C2C12 miyoblastlarının benzersiz şekli ve miyoblast hücre halkalarına ve ardından serumla desteklenen ortamda olgun miyotüplere dönüşmeleri, bu hücrelerin dinamik doğasının ve iskelet kası araştırmalarındaki potansiyellerinin altını çizmektedir.

Araştırmacılar, in vivo kas koşullarını simüle etmek amacıyla C2C12 hücre kültürleri için jelatin hidrojeller gibi substratlar kullanarak kas hücresi gelişimi ve hücre dışı matris etkileri üzerine detaylı çalışmalar yürütmektedir. Metabolik profilleme, temel proteinlere ve kalsiyumun kasılmadaki rolüne odaklanarak kas oluşumu ve iyileşmesinde yer alan yollara ilişkin önemli bilgiler ortaya koymaktadır. Gen susturma teknikleri, kas rejenerasyonunda SMAD1 fosforilasyonunun önemini vurgulayarak farklılaşma sürecini daha da aydınlatır ve kas kaybı ve yaralanmasında iyileşmeyi anlamak için çok önemlidir.

Özetle, C2C12 hücre hattı, biyomedikal araştırma alanında kritik bir araç olarak hizmet etmekte ve kas oluşumu, farklılaşma, gen ekspresyonu ve miyofilamentlerin, ara filament proteinlerinin ve bu hücresel süreçlerin ortaya çıktığı genel organizma bağlamının önemli rolü de dahil olmak üzere çeşitli faktörlerin iskelet kası hücre soyu üzerindeki derin etkisini araştırmak için çok yönlü bir platform sunmaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın