HaCaT-ras II-4

תאי HaCaT-ras II-4 הם מודל תאי יוצא דופן ונחקר בהרחבה במדעי הביולוגיה. תאים אלה נגזרים מתאי קרטניציטים בעור האדם, המכונים תאי HaCaT, אשר עברו שינוי באמצעות טרנספקציה עם האונקוגן c-Ha-ras (EJ). הבחירה בתאים אלה התבססה על עמידותם ל-G418, אנטיביוטיקה סלקטיבית, כפי שתואר במחקר מקיף שנערך על ידי Boukamp et al. בשנת 1990.

מאפיין בולט של תאי HaCaT-ras II-4 הוא אופיין הטומורגני. כאשר תאים משובטים אלה מוזרקים לעכברי Balb/c-nu/nu, הם מפגינים התנהגות מרתקת על ידי יצירת קרצינומות של תאי קשקש מובחנים מאוד ופולשניים מקומית. תכונה ייחודית זו מאפשרת לחוקרים לחקור את מנגנוני התפתחות והתקדמות הגידול בסביבה ניסויית מבוקרת.

תאי HaCaT-ras II-4 נגזרים בעיקר מאוכלוסייה קווקזית, מה שמבטיח את הרלוונטיות שלהם לקבוצה אתנית ספציפית במחקרים מדעיים. מקורם ומאפייניהם הופכים אותם למשאב יקר ערך עבור חוקרים המעוניינים לחקור היבטים שונים של ביולוגיה והבחנה של העור.

תאים אלה בעלי פנוטיפ מובחן חלקית עד מלא בתנאי תרבית טיפוסיים. פנוטיפ זה מיוחס לנוכחות שופעת של סידן הן במדיום מסורתי והן בסרום עגלי, המספק סביבה אידיאלית לתאים להפגין מאפיינים הדומים לאלה של תאי עור בוגרים. תכונה זו מאפשרת לחוקרים לחקור את התהליכים המורכבים הכרוכים בהתפתחות העור, בריפוי פצעים ובהבחנה אפידרמית.

בזכות אופיין הטומורגני ויכולתן לשחזר את הביולוגיה של העור במבחנה, תאי HaCaT-ras II-4 מציעים הזדמנות ייחודית לחקור את המסלולים המולקולריים הקשורים לסרטן העור ולהפרעות אחרות הקשורות לעור. באמצעות מודל תאי יוצא דופן זה, חוקרים יכולים להשיג תובנות מעמיקות יותר על המנגנונים הבסיסיים של טומורגנזה, פוטנציאל פולשני והתערבויות טיפוליות.

תאי HaCaT-ras II-4 הם כלי חיוני למחקר במדעי הביולוגיה, במיוחד בביולוגיה של העור ובמחקרים על התמיינות. מקורם בקרטינוציטים של עור אנושי שהפכו לבלתי מותיים באופן ספונטני, השינוי שחל בהם עם האונקוגן c-Ha-ras (EJ) והתנהגותם המסרטנת בעכברים הופכים אותם לכלי יקר ערך לחקר מחלות הקשורות לעור וגישות טיפוליות. על ידי ניצול המאפיינים הייחודיים של תאי HaCaT-ras II-4, חוקרים יכולים להשיג הבנה מעמיקה יותר של ביולוגיה העור ולתרום לקידום הידע הרפואי ואפשרויות הטיפול במגוון מחלות עור.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. השלכת המדיום הישן: הסר את המדיום הישן מהבקבוקים.
2. שטוף את התאים: הוסף 3-5 מ"ל PBS (ללא סידן ומגנזיום) לבקבוקי T25, או 5-10 מ"ל לבקבוקי T75, כדי לשטוף את התאים הדבוקים.
3. הוסף תמיסת EDTA: כסה את שכבת התאים לחלוטין בתמיסת EDTA 0.05% שהוכנה זה עתה - השתמש ב-1-2 מ"ל לבקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל לבקבוקי T75.
4. דגירה: דגרו את הבקבוקים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות.
5. הוסף תמיסת טריפסין/EDTA: לאחר הדגירה, הוסף תמיסת טריפסין/EDTA טרייה (0.05% טריפסין, 0.025% EDTA) לבקבוקים, תוך הקפדה על כיסוי מלא של התאים - השתמש ב-1 מ"ל לבקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל לבקבוקי T75.
6. עקוב אחר ההתנתקות: התבונן בתאים, אשר אמורים להתנתק תוך 1-2 דקות.
7. נטרול הטריפסין: הוסף תמיסת תרבית תאים המכילה FBS כדי לעצור את פעילות הטריפסין.
8. העברת תאים: מזגו את תמיסת התאים לתוך בקבוקים חדשים שמולאו מראש במדיום תרבית טרי.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו