HaCaT-ras II-4

Tế bào HaCaT-ras II-4 là một mô hình tế bào đáng chú ý và được nghiên cứu rộng rãi trong khoa học sinh học. Các tế bào này được phân lập từ các tế bào keratinocyte da người tự nhiên bất tử hóa, được gọi là tế bào HaCaT, sau đó được biến đổi thông qua quá trình chuyển gen bằng gen ung thư c-Ha-ras (EJ). Việc lựa chọn các tế bào này dựa trên khả năng kháng lại G418, một loại kháng sinh chọn lọc, như đã mô tả trong nghiên cứu toàn diện của Boukamp et al. vào năm 1990.

Một đặc điểm nổi bật của tế bào HaCaT-ras II-4 là tính chất gây ung thư của chúng. Khi các tế bào dòng này được tiêm vào chuột Balb/c-nu/nu, chúng thể hiện hành vi thú vị bằng cách hình thành các khối u biểu mô vảy phân hóa cao và xâm lấn cục bộ. Tính chất độc đáo này cho phép các nhà nghiên cứu khám phá các cơ chế phát triển và tiến triển của khối u trong môi trường thí nghiệm được kiểm soát.

Tế bào HaCaT-ras II-4 chủ yếu được lấy từ dân số Caucasian, đảm bảo tính liên quan đến một nhóm dân tộc cụ thể trong các nghiên cứu khoa học. Nguồn gốc và đặc tính của chúng khiến chúng trở thành một nguồn tài nguyên vô giá cho các nhà nghiên cứu quan tâm đến việc nghiên cứu các khía cạnh sinh học da và phân hóa.

Các tế bào này có biểu hiện phân hóa từ một phần đến hoàn toàn dưới điều kiện nuôi cấy thông thường. Biểu hiện này được cho là do sự hiện diện dồi dào của canxi trong cả môi trường nuôi cấy truyền thống và huyết thanh bò non, tạo ra môi trường lý tưởng cho các tế bào thể hiện các đặc điểm tương tự như tế bào da trưởng thành. Tính năng này cho phép các nhà nghiên cứu điều tra các quá trình phức tạp liên quan đến phát triển da, lành vết thương và phân hóa biểu bì.

Với bản chất gây ung thư và khả năng tái tạo sinh học da trong ống nghiệm, tế bào HaCaT-ras II-4 cung cấp cơ hội duy nhất để khám phá các con đường phân tử liên quan đến ung thư da và các rối loạn da khác. Bằng cách sử dụng mô hình tế bào đặc biệt này, các nhà nghiên cứu có thể hiểu sâu hơn về các cơ chế cơ bản của quá trình gây ung thư, tiềm năng xâm lấn và các can thiệp điều trị.

Tế bào HaCaT-ras II-4 là công cụ quan trọng trong nghiên cứu sinh học, đặc biệt trong lĩnh vực sinh học da và nghiên cứu biệt hóa. Nguồn gốc từ các tế bào keratinocyte da người tự nhiên bất tử, được biến đổi bằng gen ung thư c-Ha-ras (EJ) và hành vi gây ung thư ở chuột khiến chúng trở thành công cụ vô giá để nghiên cứu các bệnh lý liên quan đến da và các phương pháp điều trị. Bằng cách khai thác các đặc tính độc đáo của tế bào HaCaT-ras II-4, các nhà nghiên cứu có thể mở ra hiểu biết sâu sắc hơn về sinh học da và góp phần vào việc nâng cao kiến thức y học và các phương án điều trị cho các rối loạn da khác nhau.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Loại bỏ môi trường cũ: Loại bỏ môi trường cũ khỏi các bình.
2. Rửa tế bào: Thêm 3-5 ml dung dịch PBS (không chứa canxi và magiê) vào bình T25, hoặc 5-10 ml vào bình T75, để rửa các tế bào bám dính.
3. Thêm dung dịch EDTA: Phủ hoàn toàn lớp tế bào bằng dung dịch EDTA 0,05% mới pha - sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75.
4. Ủ: Ủ ống nghiệm ở 37°C trong 10 phút.
5. Thêm dung dịch Trypsin/EDTA: Sau khi ủ, thêm dung dịch Trypsin/EDTA mới pha (0,05% Trypsin, 0,025% EDTA) vào các bình, đảm bảo tế bào được phủ hoàn toàn - sử dụng 1 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75.
6. Theo dõi quá trình tách rời: Quan sát tế bào, chúng nên tách rời trong vòng 1-2 phút.
7. Trung hòa trypsin: Thêm môi trường nuôi cấy tế bào chứa FBS để ngừng hoạt động của trypsin.
8. Chuyển tế bào: Phân phối hỗn hợp tế bào vào các bình nuôi cấy mới đã được đổ sẵn môi trường nuôi cấy tươi.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.