HaCaT-ras II-4

เซลล์ HaCaT-ras II-4 เป็นแบบจำลองเซลล์ที่น่าทึ่งและได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวางในวิทยาศาสตร์ชีวภาพ เซลล์เหล่านี้ได้มาจากเคราติโนไซต์ของผิวหนังมนุษย์ที่กลายเป็นอมตะโดยธรรมชาติ ซึ่งรู้จักกันในชื่อเซลล์ HaCaT ซึ่งถูกดัดแปลงผ่านการถ่ายโอนยีนด้วย c-Ha-ras (EJ) onogeneการคัดเลือกเซลล์เหล่านี้ขึ้นอยู่กับความต้านทานต่อ G418 ซึ่งเป็นยาปฏิชีวนะที่เลือกทำลายเซลล์ได้ ตามที่ได้อธิบายไว้ในงานวิจัยที่ครอบคลุมซึ่งดำเนินการโดย Boukamp และคณะในปี 1990

ลักษณะเด่นอย่างหนึ่งของเซลล์ HaCaT-ras II-4 คือความสามารถในการก่อให้เกิดเนื้องอก เมื่อเซลล์โคลนเหล่านี้ถูกฉีดเข้าสู่หนู Balb/c-nu/nu จะแสดงพฤติกรรมที่น่าสนใจโดยก่อให้เกิดมะเร็งเซลล์สแควมัสที่มีการเจริญเติบโตสูงและมีความรุกรานในท้องถิ่น คุณสมบัติพิเศษนี้ทำให้นักวิจัยสามารถศึกษาการพัฒนาและกลไกการลุกลามของเนื้องอกในสภาพแวดล้อมที่ควบคุมได้

เซลล์ HaCaT-ras II-4 มีต้นกำเนิดหลักจากประชากรเชื้อสายคอเคเชียน ซึ่งช่วยให้มีความเกี่ยวข้องกับกลุ่มชาติพันธุ์เฉพาะในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ ลักษณะและแหล่งกำเนิดของเซลล์เหล่านี้ทำให้เป็นทรัพยากรอันมีค่าสำหรับนักวิจัยที่สนใจศึกษาชีววิทยาของผิวหนังและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ในแง่มุมต่างๆ

เซลล์เหล่านี้มีลักษณะทางฟีโนไทป์ที่เปลี่ยนแปลงไปบางส่วนถึงสมบูรณ์ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงทั่วไป ลักษณะนี้เกิดจากการมีแคลเซียมในปริมาณมากทั้งในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบดั้งเดิมและเซรั่มจากเลือดลูกวัว ซึ่งสร้างสภาพแวดล้อมที่เหมาะสมสำหรับเซลล์ในการแสดงลักษณะที่คล้ายกับเซลล์ผิวหนังที่สมบูรณ์ คุณสมบัตินี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาขั้นตอนที่ซับซ้อนที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาผิวหนัง การหายของบาดแผล และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ผิวหนังชั้นนอก

ด้วยลักษณะการก่อเนื้องอกและความสามารถในการจำลองชีววิทยาของผิวหนังในหลอดทดลอง เซลล์ HaCaT-ras II-4 จึงเป็นโอกาสพิเศษในการสำรวจเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งผิวหนังและความผิดปกติอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องกับผิวหนัง ด้วยการใช้แบบจำลองเซลล์ที่ยอดเยี่ยมนี้ นักวิจัยสามารถเข้าใจกลไกพื้นฐานของการเกิดเนื้องอก ศักยภาพในการรุกราน และการแทรกแซงทางการรักษาได้ลึกซึ้งยิ่งขึ้น

เซลล์ HaCaT-ras II-4 เป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ชีวภาพ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในชีววิทยาผิวหนังและการศึกษาการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ การที่เซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดจากเคราติโนไซต์ของผิวหนังมนุษย์ที่เกิดการอมตะโดยธรรมชาติ การดัดแปลงด้วยยีนก่อมะเร็ง c-Ha-ras (EJ) และการแสดงพฤติกรรมก่อเนื้องอกในหนูทดลอง ทำให้เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาโรคที่เกี่ยวข้องกับผิวหนังและแนวทางการรักษาด้วยการนำคุณลักษณะเฉพาะของเซลล์ HaCaT-ras II-4 มาใช้ นักวิจัยสามารถไขความเข้าใจในระดับลึกเกี่ยวกับชีววิทยาของผิวหนัง และมีส่วนร่วมในการพัฒนาความรู้ทางการแพทย์และทางเลือกในการรักษาโรคผิวหนังต่างๆ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. ทิ้งสื่อเก่า: นำสื่อเก่าออกจากขวด
2. ล้างเซลล์: เติม PBS (ปราศจากแคลเซียมและแมกนีเซียม) 3-5 มล. ลงในขวด T25 หรือ 5-10 มล. ลงในขวด T75 เพื่อล้างเซลล์ที่เกาะติด
3. เติมสารละลาย EDTA: ปิดชั้นเซลล์ให้มิดด้วยสารละลาย EDTA 0.05% ที่เตรียมใหม่ - ใช้ 1-2 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 2.5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75
4. การบ่ม: บ่มขวดแก้วที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที
5. เติมสารละลายทริปซิน/EDTA: หลังจากการบ่ม ให้เติมสารละลายทริปซิน/EDTA ที่เตรียมสดใหม่ (ทริปซิน 0.05%, EDTA 0.025%) ลงในขวดเพาะเลี้ยง โดยให้แน่ใจว่าเซลล์ถูกปกคลุมอย่างทั่วถึง—ใช้ 1 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75
6. การสังเกตการหลุดลอก: สังเกตเซลล์ซึ่งควรจะหลุดออกภายใน 1-2 นาที
7. ทำให้ทริปซินเป็นกลาง: เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มี FBS เพื่อหยุดการทำงานของทริปซิน
8. ถ่ายเซลล์: ถ่ายสารแขวนลอยเซลล์ลงในขวดใหม่ซึ่งเติมอาหารเลี้ยงเชื้อสดไว้ล่วงหน้า

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.