HaCaT-ras II-4

HaCaT-ras II-4 細胞是生物科學領域中一個備受矚目且廣受研究的細胞模型。這些細胞源自自發性永生化的人類皮膚角質形成細胞（即 HaCaT 細胞），並透過轉染 c-Ha-ras (EJ) 致癌基因進行了基因改造。 根據 Boukamp 等人於 1990 年進行的一項全面研究所述，這些細胞是基於其對選擇性抗生素 G418 的抗性而被篩選出來的。

HaCaT-ras II-4 細胞的一個顯著特徵是其致瘤性。 當這些克隆細胞被注射到 Balb/c-nu/nu 小鼠體內時，會展現出引人入勝的行為——形成高度分化且具有局部侵襲性的鱗狀細胞癌。這項獨特特性使研究人員能夠在受控的實驗環境中探索腫瘤的發育與進展機制。

HaCaT-ras II-4 細胞主要源自白人族群，確保其在科學研究中與特定族群具有相關性。其來源與特性使其成為對研究各種皮膚生物學及分化方面感興趣的研究人員不可或缺的資源。

在典型培養條件下，這些細胞呈現部分至完全分化的表型。 此表型歸因於傳統培養基及胎牛血清中鈣離子的豐富含量，這為細胞提供了展現類似成熟皮膚細胞特徵的理想環境。此特性使研究人員得以探究皮膚發育、傷口癒合及表皮分化所涉及的複雜過程。

憑藉其致瘤性及在體外重現皮膚生物學的能力，HaCaT-ras II-4 細胞為探索與皮膚癌及其他皮膚相關疾病相關的分子途徑提供了獨特契機。透過運用此卓越的細胞模型，研究人員能更深入地了解腫瘤發生、侵襲潛能及治療干預措施的潛在機制。

HaCaT-ras II-4 細胞是生物科學研究的重要工具，特別適用於皮膚生物學及分化研究。 該細胞源自自發性永生化的人類皮膚角質形成細胞，經 c-Ha-ras (EJ) 致癌基因修飾後，並在小鼠體內展現出腫瘤形成行為，使其在研究皮膚相關疾病及治療方法方面具有無可替代的價值。 透過運用 HaCaT-ras II-4 細胞的獨特特性，研究人員能更深入地理解皮膚生物學，並有助於推進醫學知識及各種皮膚疾病的治療方案。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. 棄置舊培養基：將舊培養基從培養瓶中倒出。
2. 洗滌細胞：向 T25 培養瓶中加入 3-5 毫升 PBS（不含鈣和鎂），或向 T75 培養瓶中加入 5-10 毫升，以洗滌貼壁細胞。
3. 加入 EDTA 溶液：用新調製的 0.05% EDTA 溶液完全覆蓋細胞層——T25 燒瓶使用 1-2 毫升，T75 燒瓶使用 2.5 毫升。
4. 孵育：將燒瓶於 37 攝氏度下孵育 10 分鐘。
5. 加入胰蛋白酶/EDTA 溶液： 孵育完成後，向培養瓶中加入新鮮配製的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA），確保細胞完全被覆蓋——T25 培養瓶使用 1 毫升，T75 培養瓶使用 2.5 毫升。
6. 監測細胞脫落：觀察細胞，細胞應在 1-2 分鐘內脫落。
7. 中和胰蛋白酶：加入含胎牛血清（FBS）的細胞培養基以停止胰蛋白酶活性。
8. 轉移細胞：將細胞懸浮液分裝至預先注入新鮮培養基的新培養瓶中。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。