HaCaT-ras II-4

HaCaT-ras II-4 细胞是生物科学中一个引人注目并被广泛研究的细胞模型。这些细胞来源于自发永生化的人类皮肤角质细胞（即 HaCaT 细胞），通过转染 c-Ha-ras （EJ）癌基因对其进行改造。正如 Boukamp 等人在 1990 年进行的综合研究中所描述的，这些细胞的选择是基于它们对 G418（一种选择性抗生素）的抗性。

HaCaT-ras II-4 细胞的一个显著特点是其致瘤性。当把这些克隆细胞注射到 Balb/c-nu/nu 小鼠体内时，它们会形成高度分化的局部浸润性鳞状细胞癌，表现出令人着迷的行为。这种独特的特性使研究人员能够在受控的实验环境中探索肿瘤发生和发展的机制。

HaCaT-ras II-4 细胞主要来源于白种人，确保了科学研究与特定种族群体的相关性。它们的来源和特点使其成为有兴趣研究各种皮肤生物学和分化问题的研究人员的宝贵资源。

在典型的培养条件下，这些细胞具有部分到完全分化的表型。这种表型是由于传统培养基和胎牛血清中含有大量的钙，为细胞提供了理想的环境，使其表现出与成熟皮肤细胞相似的特征。研究人员可利用这一特性研究皮肤发育、伤口愈合和表皮分化的复杂过程。

HaCaT-ras II-4 细胞具有致肿瘤性，能在体外复制皮肤生物学特性，为探索与皮肤癌和其他皮肤相关疾病有关的分子途径提供了独特的机会。通过利用这种特殊的细胞模型，研究人员可以更深入地了解肿瘤发生、侵袭潜力和治疗干预的内在机制。

HaCaT-ras II-4 细胞是生物科学研究，特别是皮肤生物学和分化研究的重要工具。HaCaT-ras II-4 细胞来源于自发永生化的人类皮肤角质细胞，经 c-Ha-ras (EJ) 癌基因修饰，随后在小鼠体内产生致瘤行为，这使它们成为研究皮肤相关疾病和治疗方法的宝贵工具。通过利用 HaCaT-ras II-4 细胞的独特特性，研究人员可以更深入地了解皮肤生物学，并促进医学知识的发展和各种皮肤疾病的治疗方案。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. 丢弃旧培养基：去除烧瓶中的旧培养基。
2. 洗涤细胞：在 T25 烧瓶中加入 3-5 毫升 PBS（不含钙和镁），或在 T75 烧瓶中加入 5-10 毫升 PBS（不含钙和镁），以清洗粘附的细胞。
3. 加入 EDTA 溶液：用新配制的 0.05% EDTA 溶液完全覆盖细胞层--T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。
4. 培养：在 37 摄氏度下培养 10 分钟。
5. 加入胰蛋白酶/EDTA 溶液：培养结束后，向烧瓶中加入新配制的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA），确保细胞被完全覆盖--T25 烧瓶用 1 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。
6. 监测脱落：观察细胞，细胞应在 1-2 分钟内脱离。
7. 中和胰蛋白酶：加入含 FBS 的细胞培养基以阻止胰蛋白酶的活性。
8. 转移细胞：将细胞悬液分装到预先注入新鲜培养基的新烧瓶中。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。