Hep-70.4

קו תאי הכבד Hep-70.4 נגזר מגידול בכבד עכבר, באופן ספציפי מזן העכברים C57BL/6J. קו תאים זה בולט במוטציות בגן p53, אשר זוהו במעברים שונים במהלך התרבות במבחנה. במעבר מספר 8, אות חלש נוסף זוהה בניתוח פולימורפיזם קונפורמציה חד-גדילי (SSCP), המעיד על נוכחות מוטציה ב-p53. במעבר מספר 38 זוהו שתי מוטציות נקודתיות נבדלות ב-p53: טרנסוורסיה מ-G:C ל-C:G בקודון 135 וטרנסוורסיה מ-C:G ל-G:C בקודון 138 של אקסון 5. מוטציות אלה הובילו לשינויים בחומצות האמינו מאלנין לפרולין ומציסטאין לטריפטופן, בהתאמה.

קו התאים Hep-70.4 מציג פנוטיפ מורפולוגי המשתנה באופן משמעותי במהלך התרבותו. חלק מהתת-קווים מציגים מורפולוגיה אפיתלית, בעוד שאחרים מציגים מראה דמוי פיברובלסט. הטרוגניות זו משקפת את האופי המורכב של קו התאים ואת יכולת ההסתגלות שלו בתנאי תרבות שונים. נוכחותם של אללים p53 נורמליים ומוטנטים במעברים המוקדמים מצביעה על כך שהמוטציות מעניקות יתרון גדילה סלקטיבי, המוביל לדומיננטיות של שיבוטים מוטנטים לאורך זמן.

ניתוח חלבוני הסיבים הבינוניים של קו התאים Hep-70.4 גילה ביטוי של קרטין פשוט K8 ו-K18, האופייניים לתאי כבד נורמליים, וכן וימנטין וקרטין K19 בדרגות שונות. דפוסים חלבוניים אלה מאשרים את מקורם ההפטוציטי של קו התאים ואת סיווגו כקו הפטומה. היציבות הגנומית של Hep-70.4 נבדקה עוד באמצעות ניתוח טביעת אצבעות DNA, שלא גילה כל חריגות מבניות משמעותיות, אם כי נצפו שינויים בעוצמות היחסיות של פסים מסוימים עם עליית מספר המעברים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו