Hep-70.4

Hep-70.4 肝瘤细胞系来源于小鼠肝脏肿瘤，特别是 C57BL/6J 小鼠品系。该细胞系的显著特点是其 p53 基因发生了突变，这些突变是在体外繁殖的不同阶段发现的。第 8 个周期时，在单链构象多态性（SSCP）分析中检测到一个微弱的附加信号，表明存在 p53 突变。到了第 38 期，发现了两个不同的 p53 点突变：第 5 外显子第 135 密码子处的 G:C 到 C:G 的转换和第 138 密码子处的 C:G 到 G:C 的转换。这些突变分别导致氨基酸从丙氨酸变为脯氨酸，半胱氨酸变为色氨酸。

Hep-70.4 细胞系在繁殖过程中表现出明显不同的形态表型。一些亚系表现出上皮形态，而另一些则表现出成纤维细胞样外观。这种异质性反映了细胞系的复杂性及其在不同培养条件下的适应性。早期传代中既存在正常的 p53 等位基因，也存在突变的 p53 等位基因，这表明突变赋予了细胞选择性生长优势，从而导致突变克隆逐渐占优势。

对 Hep-70.4 细胞系的中间丝蛋白分析表明，正常肝细胞中典型的简单角蛋白 K8 和 K18 以及波形蛋白和角蛋白 K19 都有不同程度的表达。这些蛋白模式证实了该细胞系来源于肝细胞，并将其归类为肝癌细胞系。通过 DNA 指纹分析进一步评估了 Hep-70.4 的基因组稳定性，尽管随着通过数的增加，某些条带的相对强度发生了变化，但没有发现任何重大的结构异常。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。