Hep-70.4

Dòng tế bào ung thư gan Hep-70.4 được phân lập từ một khối u gan của chuột, cụ thể là từ dòng chuột C57BL/6J. Dòng tế bào này nổi bật với các đột biến trong gen p53, được phát hiện ở các giai đoạn khác nhau trong quá trình nuôi cấy in vitro. Tại giai đoạn nuôi cấy số 8, một tín hiệu yếu bổ sung được phát hiện trong phân tích đa hình cấu trúc đơn sợi (SSCP), cho thấy sự hiện diện của đột biến p53. Tại lần nhân giống thứ 38, hai đột biến điểm p53 riêng biệt đã được xác định: một đột biến chuyển đổi G:C thành C:G tại codon 135 và một đột biến chuyển đổi C:G thành G:C tại codon 138 của exon 5. Các đột biến này dẫn đến sự thay đổi axit amin từ alanine thành proline và từ cysteine thành tryptophan, tương ứng.

Dòng tế bào Hep-70.4 thể hiện một biểu hiện hình thái học thay đổi đáng kể trong quá trình nhân lên. Một số dòng con có hình thái biểu mô, trong khi những dòng khác có hình thái tương tự tế bào sợi. Sự đa dạng này phản ánh bản chất phức tạp của dòng tế bào và khả năng thích nghi của nó dưới các điều kiện nuôi cấy khác nhau. Sự hiện diện của cả alen p53 bình thường và đột biến trong các lần nhân lên ban đầu cho thấy các đột biến mang lại lợi thế tăng trưởng chọn lọc, dẫn đến sự chiếm ưu thế của các dòng đột biến theo thời gian.

Phân tích protein sợi trung gian của dòng tế bào Hep-70.4 cho thấy sự biểu hiện của các keratin đơn giản K8 và K18, đặc trưng cho tế bào gan bình thường, cũng như vimentin và keratin K19 ở mức độ khác nhau. Các mẫu protein này xác nhận nguồn gốc tế bào gan của dòng tế bào và phân loại nó là dòng tế bào ung thư gan. Sự ổn định gen của Hep-70.4 được đánh giá thêm thông qua phân tích dấu vân tay DNA, không phát hiện bất kỳ bất thường cấu trúc lớn nào, mặc dù có sự thay đổi về cường độ tương đối của một số dải khi số lần truyền tăng lên.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.