C127

As células C127, originárias de tecidos epiteliais mamários murinos, constituem uma linhagem celular de mamíferos indispensável, que estabelece uma base sólida para uma infinidade de estudos biológicos. Essas células passaram por um rigoroso processo de engenharia, envolvendo a infecção por vírus especificamente projetados que integram a RNA polimerase T7, regulada por um promotor viral, em seu genoma. A flexibilidade das células C127 é ainda mais aprimorada pela introdução de um vírus recombinante adicional que carrega o cDNA do regulador de condutância transmembranar da fibrose cística (CFTR) sob o controle de um promotor T7 ou, alternativamente, de um plasmídeo transfectado portador do mesmo promotor. Essa configuração genética permite o controle preciso da expressão proteica, adaptada para produzir proteínas específicas, tornando assim as células C127 uma ferramenta excepcional para estudos de expressão proteica.

A natureza epitelial das células C127, reflexo de sua origem nos tecidos da glândula mamária, favorece seu crescimento de forma aderente. Elas apresentam rápida proliferação e podem ser empregadas para examinar processos celulares, crescimento e diferenciação em diversas condições experimentais. As modificações genéticas únicas presentes nessas células tornam-nas um modelo ideal para experimentos de transfecção celular estável, permitindo que pesquisadores insiram material genético estranho e explorem funções gênicas, interações proteicas e as consequências das modificações genéticas. Além disso, seu uso em cultura celular 3D tem sido cada vez mais reconhecido, proporcionando insights sobre interações célula-célula, morfogênese tecidual e modelagem de doenças com maior relevância fisiológica, ampliando assim sua utilidade além das tradicionais culturas 2D.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.