Skip to content
C127
Tissue
ต่อมน้ำนม
Disease
เนื้องอกมะเร็งของต่อมน้ำนมหนู
Synonyms
C-127

Documents

C127

Cell line · Product number 305169

C127 cells, originating from murine mammary epithelial tissues, are an indispensable mammalian cell line that lays a solid groundwork for a multitude of b...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ C127 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อเยื่อบุต่อมน้ำนมของหนู เป็นสายพันธุ์เซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่ขาดไม่ได้และวางรากฐานที่มั่นคงสำหรับการศึกษาทางชีววิทยาหลากหลายแขนง เซลล์เหล่านี้ผ่านกระบวนการวิศวกรรมที่เข้มงวด โดยมีการติดเชื้อไวรัสที่ออกแบบเฉพาะ ซึ่งไวรัสจะนำ T7 RNA polymerase ที่ขับเคลื่อนโดยโปรโมเตอร์ของไวรัสเข้าสู่จีโนมของเซลล์ความยืดหยุ่นของเซลล์ C127 ได้รับการปรับปรุงเพิ่มเติมโดยการแนะนำไวรัสรีคอมบิแนนต์เพิ่มเติมที่นำ cDNA ของ cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ T7 หรือทางเลือกอื่นคือพลาสมิดที่ถูกถ่ายโอนซึ่งมีโปรโมเตอร์เดียวกัน การตั้งค่าทางพันธุกรรมนี้ช่วยให้สามารถควบคุมการแสดงออกของโปรตีนได้อย่างแม่นยำ ปรับให้เหมาะสมกับการผลิตโปรตีนเฉพาะ ทำให้เซลล์ C127 เป็นเครื่องมือที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาการแสดงออกของโปรตีน

ลักษณะของเซลล์ C127 ที่เป็นเซลล์เยื่อบุผิว ซึ่งสะท้อนถึงการมีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อต่อมน้ำนม ส่งเสริมการเจริญเติบโตแบบเกาะติดของเซลล์เหล่านี้ เซลล์มีการแบ่งตัวอย่างรวดเร็วและสามารถนำมาใช้ในการศึกษาการเจริญเติบโต การขยายพันธุ์ และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ภายใต้สภาวะการทดลองที่หลากหลาย การดัดแปลงพันธุกรรมเฉพาะที่มีอยู่ในเซลล์เหล่านี้ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการทดลองถ่ายโอนยีนเข้าสู่เซลล์อย่างคงที่ ช่วยให้ผู้วิจัยสามารถแทรกสารพันธุกรรมจากภายนอกและศึกษาการทำงานของยีน การปฏิสัมพันธ์ของโปรตีน และผลกระทบของการดัดแปลงพันธุกรรมได้นอกจากนี้ การใช้ในวัฒนธรรมเซลล์ 3 มิติได้รับการยอมรับเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่อง ซึ่งช่วยให้เข้าใจการสื่อสารระหว่างเซลล์ การก่อตัวของเนื้อเยื่อ และการจำลองโรคที่มีความเกี่ยวข้องทางสรีรวิทยามากขึ้น ทำให้ประโยชน์ของมันขยายออกไปไกลกว่าวัฒนธรรมเซลล์ 2 มิติแบบดั้งเดิม

Tissue
ต่อมน้ำนม
Disease
เนื้องอกมะเร็งของต่อมน้ำนมหนู
Synonyms
  • C-127

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
C127 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305169)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
อาร์ไอไอ