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C127
Tissue
Glande mammaire
Disease
Néoplasmes malins de la glande mammaire chez la souris
Synonyms
C-127

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C127

Cell line · Product number 305169

C127 cells, originating from murine mammary epithelial tissues, are an indispensable mammalian cell line that lays a solid groundwork for a multitude of b...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Les cellules C127, issues de tissus épithéliaux mammaires murins, constituent une lignée cellulaire mammifère indispensable qui offre une base solide pour une multitude d’études biologiques. Ces cellules ont fait l’objet d’un processus d’ingénierie rigoureux, impliquant une infection par des virus spécialement conçus qui intègrent dans leur génome une ARN polymérase T7 régulée par un promoteur viral. La polyvalence des cellules C127 est encore renforcée par l’introduction d’un virus recombinant supplémentaire portant l’ADNc du régulateur de conductance transmembranaire de la fibrose kystique (CFTR) sous le contrôle d’un promoteur T7, ou bien d’un plasmide transfecté portant le même promoteur. Cette configuration génétique permet un contrôle précis de l’expression protéique, adapté à la production de protéines spécifiques, faisant ainsi des cellules C127 un outil exceptionnel pour les études sur l’expression protéique.

La nature épithéliale des cellules C127, qui reflète leur origine à partir de tissus de la glande mammaire, favorise leur croissance de manière adhérente. Elles présentent une prolifération rapide et peuvent être utilisées pour étudier en détail les processus cellulaires, la croissance et la différenciation dans diverses conditions expérimentales. Les modifications génétiques uniques présentes dans ces cellules en font un modèle idéal pour les expériences de transfection cellulaire stable, permettant aux chercheurs d’insérer du matériel génétique étranger et d’explorer les fonctions des gènes, les interactions protéiques et les conséquences des modifications génétiques. De plus, leur utilisation en culture cellulaire 3D est de plus en plus reconnue; elle permet de mieux comprendre les interactions intercellulaires, la morphogenèse tissulaire et la modélisation des maladies avec une plus grande pertinence physiologique, élargissant ainsi leur utilité au-delà des cultures 2D traditionnelles.

Tissue
Glande mammaire
Disease
Néoplasmes malins de la glande mammaire chez la souris
Synonyms
  • C-127

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial

04Identifiers

Citation
C127 (numéro de catalogue Cytion 305169)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Breed / subspecies
RIII