Ga naar de inhoud
C127
Weefsel
Borstklier
Ziekte
Kwaadaardige gezwellen van de borstklier van de muis
Synoniemen
C-127

Documenten

C127

Cell line · Productnummer 305169

C127-cellen, afkomstig uit borstklierweefsel van muizen, vormen een onmisbare zoogdiercellijn die een solide basis legt voor een groot aantal b...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

C127 cellen, afkomstig van muizenepitheelweefsel, zijn een onmisbare zoogdiercellijn die een solide basis vormt voor een groot aantal biologische studies. Deze cellen hebben een rigoureus engineeringproces ondergaan, waarbij ze geïnfecteerd werden met specifiek ontworpen virussen die T7 RNA polymerase, aangestuurd door een virale promotor, in hun genoom integreerden. De flexibiliteit van C127 cellen wordt verder vergroot door de introductie van een extra recombinant virus dat cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) cDNA draagt onder controle van een T7 promoter, of als alternatief een getransfecteerd plasmide met dezelfde promoter. Deze genetische opstelling maakt precieze controle over eiwitexpressie mogelijk, op maat gemaakt om specifieke eiwitten te produceren, waardoor C127 cellen een uitzonderlijk instrument zijn voor eiwitexpressiestudies.

De epitheliale aard van C127 cellen, die afkomstig zijn van borstklierweefsel, ondersteunt hun adherente groei. Ze vertonen een snelle proliferatie en kunnen worden gebruikt om cellulaire processen, groei en differentiatie onder verschillende experimentele omstandigheden te onderzoeken. De unieke genetische modificaties in deze cellen maken ze tot een ideaal model voor stabiele celtransfectie-experimenten, waardoor onderzoekers vreemd genetisch materiaal kunnen invoegen en genfuncties, eiwitinteracties en de gevolgen van genetische modificaties kunnen onderzoeken. Bovendien wordt het gebruik van 3D-cellen steeds meer erkend, waardoor inzichten in cel-cel interacties, weefsel morfogenese en modellering van ziekten met een grotere fysiologische relevantie worden verkregen, waardoor hun nut verder gaat dan de traditionele 2D-culturen.

Weefsel
Borstklier
Ziekte
Kwaadaardige gezwellen van de borstklier van de muis
Synoniemen
  • C-127

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
C127 (Cytion catalogusnummer 305169)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
RIII