Přejít na obsah
C127
Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Zhoubné novotvary mléčné žlázy myší
Synonyma
C-127

Dokumenty

C127

Cell line · Číslo výrobku 305169

Buňky C127, pocházející z epiteliální tkáně myšího mléčné žlázy, představují nepostradatelnou savčí buněčnou linii, která poskytuje pevný základ pro celou řadu...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky C127, pocházející z epitelových tkání mléčné žlázy myší, jsou nepostradatelnou buněčnou linií savců, která představuje pevný základ pro řadu biologických studií. Tyto buňky prošly přísným inženýrským procesem, který zahrnuje infekci speciálně navrženými viry, které do jejich genomu integrují RNA polymerázu T7 řízenou virovým promotorem. Flexibilita buněk C127 je dále zvýšena zavedením dalšího rekombinantního viru, který nese cDNA regulátoru transmembránového vedení cystické fibrózy (CFTR) pod kontrolou promotoru T7, případně transfekovaného plazmidu nesoucího stejný promotor. Toto genetické uspořádání umožňuje přesnou kontrolu nad expresí proteinů, přizpůsobenou produkci specifických proteinů, a činí tak z buněk C127 výjimečný nástroj pro studie exprese proteinů.

Epitelová povaha buněk C127, která odráží jejich původ z tkání mléčné žlázy, podporuje jejich adherentní růst. Vykazují rychlou proliferaci a lze je použít ke zkoumání buněčných procesů, růstu a diferenciace za různých experimentálních podmínek. Jedinečné genetické modifikace přítomné v těchto buňkách z nich činí ideální model pro experimenty se stabilní transfekcí buněk, což výzkumníkům umožňuje vkládat cizí genetický materiál a zkoumat funkce genů, interakce proteinů a důsledky genetických modifikací. Kromě toho se stále více uznává jejich využití v 3D buněčných kulturách, které poskytují poznatky o interakcích mezi buňkami, morfogenezi tkání a modelování nemocí s větší fyziologickou relevancí, čímž se jejich využitelnost rozšiřuje nad rámec tradičních 2D kultur.

Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Zhoubné novotvary mléčné žlázy myší
Synonyma
  • C-127

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
C127 (katalogové číslo Cytion 305169)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
RIII