Tartalomra ugrás
C127
Szövet
Emlőmirigy
Betegség
Az egér emlőmirigy rosszindulatú daganatai
Szinonimák
C-127

Dokumentumok

C127

Cell line · Termékszám 305169

Az egér emlőepiteliális szövetekből származó C127 sejtek egy nélkülözhetetlen emlős sejtvonal, amely szilárd alapot biztosít számos…

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az egér emlőhámszövetekből származó C127 sejtek nélkülözhetetlen emlős sejtvonal, amely számos biológiai vizsgálat szilárd alapját képezi. Ezek a sejtek szigorú mérnöki folyamaton mentek keresztül, amelynek során olyan speciálisan tervezett vírusokkal fertőzték meg őket, amelyek a T7 RNS-polimerázt egy vírus promóter által vezérelve integrálják a genomjukba. A C127 sejtek rugalmasságát tovább fokozza egy további rekombináns vírus bevitele, amely a cisztás fibrózis transzmembrán konduktancia szabályozó (CFTR) cDNS-t hordozza egy T7 promóter irányítása alatt, vagy alternatívaként egy transzfektált plazmid, amely ugyanezt a promótert hordozza. Ez a genetikai felépítés lehetővé teszi a fehérjeexpresszió pontos, specifikus fehérjék előállítására szabott ellenőrzését, ezáltal a C127 sejtek kivételes eszközzé válnak a fehérjeexpressziós vizsgálatokhoz.

A C127 sejtek epithelialis jellege, amely tükrözi az emlőmirigy szövetekből való származásukat, támogatja a tapadó módon történő növekedésüket. A sejtek gyors proliferációt mutatnak, és különböző kísérleti körülmények között alkalmazhatók a sejtfolyamatok, a növekedés és a differenciálódás vizsgálatára. Az ezekben a sejtekben jelenlévő egyedi genetikai módosítások ideális modellé teszik őket stabil sejttranszfekciós kísérletekhez, lehetővé téve a kutatók számára idegen genetikai anyag bevitelét és a génfunkciók, fehérje kölcsönhatások és a genetikai módosítások következményeinek vizsgálatát. Emellett egyre inkább felismerik a 3D-s sejtkultúrákban való felhasználásukat, amelyek nagyobb fiziológiai relevanciával nyújtanak betekintést a sejt-sejt kölcsönhatásokba, a szöveti morfogenezisbe és a betegségek modellezésébe, ezáltal a hagyományos 2D-s kultúrákon túlmutató hasznosságukat is kiterjesztik.

Szövet
Emlőmirigy
Betegség
Az egér emlőmirigy rosszindulatú daganatai
Szinonimák
  • C-127

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
C127 (Cytion katalógusszám: 305169)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
RIII