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C127
Gewebe
Brustdrüse
Krankheit
Bösartige Neubildungen der Brustdrüse der Maus
Synonyme
C-127

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C127

Cell line · Artikelnummer 305169

C127-Zellen, die aus dem Brustgewebe von Mäusen stammen, sind eine unverzichtbare Säugetierzelllinie, die eine solide Grundlage für eine Vielzahl von ... bildet.

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

C127-Zellen, die aus dem Brustepithelgewebe von Mäusen stammen, sind eine unverzichtbare Säugetierzelllinie, die eine solide Grundlage für eine Vielzahl von biologischen Studien bildet. Diese Zellen wurden einem rigorosen Entwicklungsprozess unterzogen, bei dem sie mit speziell entwickelten Viren infiziert wurden, die die von einem viralen Promotor angetriebene T7-RNA-Polymerase in ihr Genom integrieren. Die Flexibilität der C127-Zellen wird durch die Einführung eines zusätzlichen rekombinanten Virus, das cDNA des Mukoviszidose-Transmembranleitfähigkeitsregulators (CFTR) unter der Kontrolle eines T7-Promotors trägt, oder alternativ durch ein transfiziertes Plasmid, das denselben Promotor trägt, weiter erhöht. Dieser genetische Aufbau ermöglicht eine präzise Kontrolle der Proteinexpression, die auf die Produktion spezifischer Proteine zugeschnitten ist, was C127-Zellen zu einem außergewöhnlichen Werkzeug für Proteinexpressionsstudien macht.

Die epitheliale Beschaffenheit der C127-Zellen, die auf ihre Herkunft aus Brustdrüsengewebe zurückzuführen ist, begünstigt ihr Wachstum in adhärenter Weise. Sie vermehren sich schnell und können zur Untersuchung zellulärer Prozesse, des Wachstums und der Differenzierung unter verschiedenen experimentellen Bedingungen eingesetzt werden. Die einzigartigen genetischen Veränderungen in diesen Zellen machen sie zu einem idealen Modell für stabile Zelltransfektionsexperimente, die es Forschern ermöglichen, fremdes genetisches Material einzufügen und Genfunktionen, Proteininteraktionen und die Folgen genetischer Veränderungen zu untersuchen. Darüber hinaus wird ihre Verwendung in 3D-Zellkulturen zunehmend anerkannt, da sie Einblicke in die Zell-Zell-Interaktionen, die Gewebemorphogenese und die Modellierung von Krankheiten mit größerer physiologischer Relevanz bieten und damit ihren Nutzen über die traditionellen 2D-Kulturen hinaus erweitern.

Gewebe
Brustdrüse
Krankheit
Bösartige Neubildungen der Brustdrüse der Maus
Synonyme
  • C-127

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
C127 (Cytion Katalognummer 305169)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
RIII