C127

As células C127, originárias de tecidos epiteliais mamários murinos, são uma linha celular de mamíferos indispensável que estabelece uma base sólida para uma multiplicidade de estudos biológicos. Estas células foram submetidas a um rigoroso processo de engenharia, que envolveu a infeção com vírus especificamente concebidos que integram no seu genoma a polimerase de ARN T7 impulsionada por um promotor viral. A flexibilidade das células C127 é ainda reforçada pela introdução de um vírus recombinante adicional que transporta o cDNA do regulador da condutância transmembranar da fibrose cística (CFTR) sob o controlo de um promotor T7 ou, em alternativa, um plasmídeo transfectado com o mesmo promotor. Esta configuração genética permite um controlo preciso da expressão proteica, adaptado para produzir proteínas específicas, tornando assim as células C127 uma ferramenta excecional para estudos de expressão proteica.

A natureza epitelial das células C127, que reflecte a sua derivação dos tecidos da glândula mamária, permite o seu crescimento de forma aderente. Apresentam uma proliferação rápida e podem ser utilizadas para analisar os processos celulares, o crescimento e a diferenciação em diversas condições experimentais. As modificações genéticas únicas presentes nestas células tornam-nas um modelo ideal para experiências de transfecção celular estável, permitindo aos investigadores inserir material genético estranho e explorar as funções dos genes, as interações das proteínas e as consequências das modificações genéticas. Além disso, a sua utilização em culturas de células 3D tem sido cada vez mais reconhecida, proporcionando conhecimentos sobre interações célula-célula, morfogénese de tecidos e modelação de doenças com maior relevância fisiológica, alargando assim a sua utilidade para além das tradicionais culturas 2D.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia