Gå direkte til indholdet
C127
Væv
Brystkirtel
Sygdom
Ondartede svulster i musens brystkirtel
Synonymer
C-127

Dokumenter

C127

Cell line · Varenummer 305169

C127-celler, der stammer fra epitelvæv i musebrystkirtler, er en uundværlig pattedyrcellelinje, der danner et solidt grundlag for en lang række b...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

C127-celler, der stammer fra murint brystvæv, er en uundværlig cellelinje fra pattedyr, der danner et solidt grundlag for en lang række biologiske undersøgelser. Disse celler har gennemgået en streng konstruktionsproces, der involverer infektion med specifikt designede vira, der integrerer T7 RNA-polymerase drevet af en viral promotor i deres genom. C127-cellernes fleksibilitet forbedres yderligere ved at indføre en ekstra rekombinant virus, der bærer cystisk fibrose transmembran-konduktansregulator (CFTR) cDNA under kontrol af en T7-promotor, eller alternativt et transfekteret plasmid med den samme promotor. Denne genetiske opsætning muliggør præcis kontrol over proteinudtrykket, skræddersyet til at producere specifikke proteiner, hvilket gør C127-celler til et enestående værktøj til proteinudtryksstudier.

C127-cellernes epiteliale natur, som afspejler, at de stammer fra brystkirtelvæv, understøtter deres vækst på en adhærent måde. De udviser hurtig spredning og kan bruges til at undersøge cellulære processer, vækst og differentiering på tværs af forskellige eksperimentelle forhold. De unikke genetiske modifikationer, der findes i disse celler, gør dem til en ideel model for stabile celletransfektionseksperimenter, så forskere kan indsætte fremmed genetisk materiale og udforske genfunktioner, proteininteraktioner og konsekvenserne af genetiske modifikationer. Derudover er deres brug i 3D-cellekulturer blevet mere og mere anerkendt, hvilket giver indsigt i celle-celle-interaktioner, vævsmorfogenese og sygdomsmodellering med større fysiologisk relevans og dermed udvider deres anvendelighed ud over traditionelle 2D-kulturer.

Væv
Brystkirtel
Sygdom
Ondartede svulster i musens brystkirtel
Synonymer
  • C-127

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
C127 (Cytion katalognummer 305169)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
RIII