İçeriğe atla
C127
Doku
Meme bezi
Hastalık
Fare meme bezinin kötü huylu neoplazmları
Eş anlamlılar
C-127

C127

Cell line · Ürün numarası 305169

Fare meme epitel dokularından elde edilen C127 hücreleri, çok sayıda araştırma için sağlam bir temel oluşturan, vazgeçilmez bir memeli hücre hattıdır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Murin meme epitel dokularından köken alan C127 hücreleri, çok sayıda biyolojik çalışma için sağlam bir temel oluşturan vazgeçilmez bir memeli hücre hattıdır. Bu hücreler, viral bir promotör tarafından yönlendirilen T7 RNA polimerazı genomlarına entegre eden özel olarak tasarlanmış virüslerle enfeksiyonu içeren titiz bir mühendislik sürecinden geçmiştir. C127 hücrelerinin esnekliği, bir T7 promotörünün kontrolü altında kistik fibroz transmembran iletkenlik regülatörü (CFTR) cDNA'sını taşıyan ek bir rekombinant virüsün veya alternatif olarak aynı promotörü taşıyan transfekte edilmiş bir plazmidin eklenmesiyle daha da geliştirilmiştir. Bu genetik kurulum, belirli proteinleri üretmek üzere uyarlanmış protein ifadesi üzerinde hassas kontrol sağlar ve böylece C127 hücrelerini protein ifadesi çalışmaları için istisnai bir araç haline getirir.

C127 hücrelerinin epitelyal yapısı, meme bezi dokularından türetilmelerini yansıtır ve yapışık bir şekilde büyümelerini destekler. Hızlı proliferasyon gösterirler ve çeşitli deneysel koşullarda hücresel süreçleri, büyümeyi ve farklılaşmayı incelemek için kullanılabilirler. Bu hücrelerde bulunan benzersiz genetik modifikasyonlar, onları kararlı hücre transfeksiyon deneyleri için ideal bir model haline getirerek araştırmacıların yabancı genetik materyal eklemesine ve gen işlevlerini, protein etkileşimlerini ve genetik modifikasyonların sonuçlarını keşfetmesine olanak tanır. Ek olarak, 3D hücre kültüründeki kullanımları giderek daha fazla kabul görmektedir ve hücre-hücre etkileşimleri, doku morfogenezi ve daha fazla fizyolojik alaka ile hastalık modellemesi hakkında içgörüler sağlamakta, böylece kullanımlarını geleneksel 2D kültürlerin ötesine taşımaktadır.

Doku
Meme bezi
Hastalık
Fare meme bezinin kötü huylu neoplazmları
Eş anlamlılar
  • C-127

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
C127 (Cytion katalog numarası 305169)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
RIII