Przejdź do treści
C127
Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Nowotwory złośliwe gruczołu sutkowego myszy
Synonimy
C-127

Dokumenty

C127

Cell line · Numer produktu 305169

Komórki C127, pochodzące z mysiej tkanki nabłonkowej gruczołu sutkowego, stanowią niezbędną linię komórkową ssaków, która zapewnia solidną podstawę dla wielu badań...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki C127, pochodzące z mysich tkanek nabłonkowych sutka, są niezbędną linią komórkową ssaków, która stanowi solidną podstawę dla wielu badań biologicznych. Komórki te zostały poddane rygorystycznemu procesowi inżynierii, obejmującemu infekcję specjalnie zaprojektowanymi wirusami, które integrują polimerazę RNA T7 napędzaną przez wirusowy promotor do ich genomu. Elastyczność komórek C127 jest dodatkowo zwiększona przez wprowadzenie dodatkowego rekombinowanego wirusa, który przenosi cDNA regulatora przewodnictwa przezbłonowego mukowiscydozy (CFTR) pod kontrolą promotora T7 lub alternatywnie transfekowanego plazmidu z tym samym promotorem. Taka konfiguracja genetyczna umożliwia precyzyjną kontrolę nad ekspresją białek, dostosowaną do produkcji określonych białek, dzięki czemu komórki C127 są wyjątkowym narzędziem do badań nad ekspresją białek.

Nabłonkowa natura komórek C127, odzwierciedlająca ich pochodzenie z tkanek gruczołu sutkowego, wspiera ich wzrost w sposób przylegający. Wykazują one szybką proliferację i mogą być wykorzystywane do badania procesów komórkowych, wzrostu i różnicowania w różnych warunkach eksperymentalnych. Unikalne modyfikacje genetyczne obecne w tych komórkach sprawiają, że są one idealnym modelem do stabilnych eksperymentów transfekcji komórek, umożliwiając naukowcom wprowadzanie obcego materiału genetycznego i badanie funkcji genów, interakcji białek i konsekwencji modyfikacji genetycznych. Dodatkowo, ich zastosowanie w hodowli komórek 3D jest coraz bardziej doceniane, zapewniając wgląd w interakcje komórka-komórka, morfogenezę tkanek i modelowanie chorób o większym znaczeniu fizjologicznym, rozszerzając tym samym ich użyteczność poza tradycyjne kultury 2D.

Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Nowotwory złośliwe gruczołu sutkowego myszy
Synonimy
  • C-127

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
C127 (numer katalogowy Cytion 305169)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
RIII