Μετάβαση στο περιεχόμενο
C127
Ιστός
Μαστικός αδένας
Ασθένεια
Κακοήθη νεοπλάσματα του μαστικού αδένα του ποντικού
Συνώνυμα
C-127

Έγγραφα

C127

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305169

Τα κύτταρα C127, τα οποία προέρχονται από επιθηλιακούς ιστούς του μαστού ποντικών, αποτελούν μια απαραίτητη κυτταρική σειρά θηλαστικών που θέτει γερά θεμέλια για μια πληθώρα...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα C127, προερχόμενα από επιθηλιακούς ιστούς μαστού ποντικού, είναι μια απαραίτητη κυτταρική σειρά θηλαστικών που θέτει στέρεες βάσεις για πλήθος βιολογικών μελετών. Τα κύτταρα αυτά έχουν υποβληθεί σε μια αυστηρή διαδικασία μηχανικής, η οποία περιλαμβάνει μόλυνση με ειδικά σχεδιασμένους ιούς που ενσωματώνουν στο γονιδίωμά τους την πολυμεράση T7 RNA που καθοδηγείται από έναν ιικό υποκινητή. Η ευελιξία των κυττάρων C127 ενισχύεται περαιτέρω με την εισαγωγή ενός πρόσθετου ανασυνδυασμένου ιού που φέρει cDNA του ρυθμιστή διαμεμβρανικής αγωγιμότητας της κυστικής ίνωσης (CFTR) υπό τον έλεγχο ενός υποκινητή T7, ή εναλλακτικά ενός διαμολυσμένου πλασμιδίου που φέρει τον ίδιο υποκινητή. Αυτή η γενετική ρύθμιση επιτρέπει τον ακριβή έλεγχο της πρωτεϊνικής έκφρασης, προσαρμοσμένο στην παραγωγή συγκεκριμένων πρωτεϊνών, καθιστώντας έτσι τα κύτταρα C127 ένα εξαιρετικό εργαλείο για μελέτες πρωτεϊνικής έκφρασης.

Η επιθηλιακή φύση των κυττάρων C127, η οποία αντικατοπτρίζει την προέλευσή τους από ιστούς του μαστικού αδένα, υποστηρίζει την ανάπτυξή τους με προσκολλημένο τρόπο. Παρουσιάζουν ταχύ πολλαπλασιασμό και μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη διερεύνηση των κυτταρικών διεργασιών, της ανάπτυξης και της διαφοροποίησης σε ποικίλες πειραματικές συνθήκες. Οι μοναδικές γενετικές τροποποιήσεις που υπάρχουν σε αυτά τα κύτταρα τα καθιστούν ιδανικό μοντέλο για πειράματα σταθερής κυτταρικής διαμόλυνσης, επιτρέποντας στους ερευνητές να εισάγουν ξένο γενετικό υλικό και να διερευνούν τις λειτουργίες των γονιδίων, τις αλληλεπιδράσεις των πρωτεϊνών και τις συνέπειες των γενετικών τροποποιήσεων. Επιπλέον, η χρήση τους στην τρισδιάστατη κυτταρική καλλιέργεια αναγνωρίζεται όλο και περισσότερο, παρέχοντας γνώσεις σχετικά με τις αλληλεπιδράσεις κυττάρων-κυττάρων, τη μορφογένεση ιστών και τη μοντελοποίηση ασθενειών με μεγαλύτερη φυσιολογική συνάφεια, επεκτείνοντας έτσι τη χρησιμότητά τους πέρα από τις παραδοσιακές καλλιέργειες 2D.

Ιστός
Μαστικός αδένας
Ασθένεια
Κακοήθη νεοπλάσματα του μαστικού αδένα του ποντικού
Συνώνυμα
  • C-127

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
C127 (αριθμός καταλόγου Cytion 305169)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_6550

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
RIII