Prejsť na obsah
C127
Tkanivo
Mliečna žľaza
Choroba
Zhubné nádory mliečnej žľazy myší
Synonymá
C-127

Dokumenty

C127

Cell line · Číslo výrobku 305169

Bunky C127, pochádzajúce z epitelových tkanív myších mliečnych žliaz, predstavujú nenahraditeľnú líniu cicavčích buniek, ktorá vytvára pevný základ pre množstvo b...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky C127 pochádzajúce z epitelových tkanív mliečnej žľazy myší sú nepostrádateľnou bunkovou líniou cicavcov, ktorá vytvára pevný základ pre množstvo biologických štúdií. Tieto bunky prešli prísnym inžinierskym procesom, ktorý zahŕňa infekciu špeciálne navrhnutými vírusmi, ktoré do ich genómu integrujú T7 RNA polymerázu riadenú vírusovým promótorom. Flexibilita buniek C127 sa ďalej zvyšuje zavedením ďalšieho rekombinantného vírusu, ktorý nesie cDNA regulátora transmembránovej vodivosti cystickej fibrózy (CFTR) pod kontrolou promótora T7, prípadne transfekčného plazmidu nesúceho rovnaký promótor. Toto genetické usporiadanie umožňuje presnú kontrolu nad expresiou proteínov, prispôsobenú na produkciu špecifických proteínov, čím sa bunky C127 stávajú výnimočným nástrojom na štúdie expresie proteínov.

Epitelová povaha buniek C127, ktorá odráža ich odvodenie z tkanív mliečnej žľazy, podporuje ich adherentný rast. Vykazujú rýchlu proliferáciu a možno ich použiť na skúmanie bunkových procesov, rastu a diferenciácie v rôznych experimentálnych podmienkach. Jedinečné genetické modifikácie prítomné v týchto bunkách z nich robia ideálny model pre experimenty so stabilnou transfekciou buniek, čo umožňuje výskumníkom vkladať cudzí genetický materiál a skúmať funkcie génov, interakcie proteínov a dôsledky genetických modifikácií. Okrem toho sa čoraz viac uznáva ich využitie v 3D bunkových kultúrach, ktoré poskytujú poznatky o interakciách medzi bunkami, morfogenéze tkanív a modelovaní chorôb s väčším fyziologickým významom, čím sa ich využiteľnosť rozširuje nad rámec tradičných 2D kultúr.

Tkanivo
Mliečna žľaza
Choroba
Zhubné nádory mliečnej žľazy myší
Synonymá
  • C-127

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
C127 (katalógové číslo Cytion 305169)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
RIII