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C127
Pañuelo de papel
Glándula mamaria
Enfermedad
Neoplasias malignas de la glándula mamaria del ratón
Sinónimos
C-127

Documentos

C127

Cell line · Número de producto 305169

Las células C127, procedentes de tejidos epiteliales mamarios murinos, constituyen una línea celular de mamífero indispensable que sienta unas bases sólidas para una gran variedad de...

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01Información general

Descripción

Las células C127, procedentes de tejidos epiteliales mamarios murinos, son una línea celular de mamíferos indispensable que sienta unas bases sólidas para multitud de estudios biológicos. Estas células han sido sometidas a un riguroso proceso de ingeniería, que implica la infección con virus específicamente diseñados que integran en su genoma la ARN polimerasa T7 impulsada por un promotor viral. La flexibilidad de las células C127 se ve reforzada por la introducción de un virus recombinante adicional portador del ADNc del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) bajo el control de un promotor T7 o, alternativamente, de un plásmido transfectado con el mismo promotor. Esta configuración genética permite un control preciso de la expresión proteica, adaptado para producir proteínas específicas, lo que convierte a las células C127 en una herramienta excepcional para los estudios de expresión proteica.

La naturaleza epitelial de las células C127, reflejo de su derivación de los tejidos de la glándula mamaria, favorece su crecimiento de forma adherente. Presentan una rápida proliferación y pueden emplearse para analizar procesos celulares, crecimiento y diferenciación en diversas condiciones experimentales. Las modificaciones genéticas únicas presentes en estas células las convierten en un modelo ideal para experimentos de transfección celular estable, lo que permite a los investigadores insertar material genético extraño y explorar las funciones de los genes, las interacciones entre proteínas y las consecuencias de las modificaciones genéticas. Además, cada vez se reconoce más su uso en cultivos celulares tridimensionales, lo que permite comprender mejor las interacciones célula-célula, la morfogénesis de los tejidos y la modelización de enfermedades con mayor relevancia fisiológica, ampliando así su utilidad más allá de los cultivos bidimensionales tradicionales.

Pañuelo de papel
Glándula mamaria
Enfermedad
Neoplasias malignas de la glándula mamaria del ratón
Sinónimos
  • C-127

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
C127 (número de catálogo 305169 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Raza / subespecie
RIII