Pereiti prie turinio
C127
Audinys
Pieno liauka
Liga
Pelės pieno liaukos piktybiniai navikai
Sinonimai
C-127

Dokumentai

C127

Cell line · Prekės numeris 305169

C127 ląstelės, kilusios iš pelių pieno liaukų epitelio audinių, yra nepakeičiama žinduolių ląstelių linija, sudaranti tvirtą pagrindą daugybei b...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

C127 ląstelės, kilusios iš pelės pieno epitelio audinių, yra nepakeičiama žinduolių ląstelių linija, kuri sudaro tvirtą pagrindą daugeliui biologinių tyrimų. Šioms ląstelėms buvo atliktas griežtas inžinerijos procesas, kurio metu jos buvo užkrėstos specialiai sukurtais virusais, integruojančiais į jų genomą viruso promotoriaus valdomą T7 RNR polimerazę. C127 ląstelių lankstumas dar labiau padidėja, kai į jas įterpiamas papildomas rekombinantinis virusas, kuriame yra cistinės fibrozės transmembraninio laidumo reguliatoriaus (CFTR) cDNA, valdoma T7 promotoriaus, arba transfekcinė plazmidė su tuo pačiu promotoriumi. Tokia genetinė sąranka leidžia tiksliai kontroliuoti baltymų raišką, pritaikytą konkrečių baltymų gamybai, todėl C127 ląstelės yra išskirtinis įrankis baltymų raiškos tyrimams.

C127 ląstelių epitelinė prigimtis, atspindinti jų kilmę iš pieno liaukos audinių, palaiko jų augimą adherentiškai. Jos pasižymi greitu dauginimusi ir gali būti naudojamos ląsteliniams procesams, augimui ir diferenciacijai tirti įvairiomis eksperimentinėmis sąlygomis. Dėl šiose ląstelėse esančių unikalių genetinių modifikacijų jos yra idealus modelis stabiliems ląstelių transfekcijos eksperimentams, leidžiantis mokslininkams įterpti svetimą genetinę medžiagą ir tirti genų funkcijas, baltymų sąveiką bei genetinių modifikacijų pasekmes. Be to, vis dažniau pripažįstamas jų naudojimas 3D ląstelių kultūrose, leidžiantis geriau suprasti ląstelių ir ląstelių sąveiką, audinių morfogenezę ir fiziologiškai svarbesnių ligų modeliavimą, taip išplečiant jų naudingumą už tradicinių 2D kultūrų ribų.

Audinys
Pieno liauka
Liga
Pelės pieno liaukos piktybiniai navikai
Sinonimai
  • C-127

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
C127 (Cytion katalogo numeris 305169)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
RIII