Mine otse sisu juurde
C127
Kude
Rinnanäärme
Haigus
Hiire rinnanäärme pahaloomulised kasvajad
Sünonüümid
C-127

Dokumendid

C127

Cell line · Toote number 305169

Hiire rinnanäärme epiteelikudest pärinevad C127-rakud on asendamatu imetajate rakuliin, mis loob kindla aluse paljudele b...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

C127 rakud, mis pärinevad hiirte rinnaepiteelidest, on asendamatu imetajate rakuliin, mis loob tugeva aluse paljudele bioloogilistele uuringutele. Need rakud on läbinud range inseneriprotsessi, mis hõlmab nakatumist spetsiaalselt loodud viirustega, mis integreerivad nende genoomi T7 RNA-polümeraasi, mida juhib viiruslik promootor. C127 rakkude paindlikkust suurendab veelgi täiendava rekombinantse viiruse lisamine, mis kannab tsüstilise fibroosi transmembraanjuhtivuse regulaatori (CFTR) cDNA-d T7 promootori kontrolli all, või alternatiivselt transfekteeritud plasmiidi, mis kannab sama promootorit. Selline geneetiline ülesehitus võimaldab täpset kontrolli valkude ekspressiooni üle, mis on kohandatud konkreetsete valkude tootmiseks, muutes C127 rakud seega erakordseks vahendiks valkude ekspressiooni uuringuteks.

C127 rakkude epiteliaalne olemus, mis peegeldab nende pärinemist rinnanäärme kudedest, toetab nende adherentset kasvu. Need rakud paljunevad kiiresti ja neid saab kasutada rakuprotsesside, kasvu ja diferentseerumise uurimiseks erinevates katsetes. Nendes rakkudes esinevad unikaalsed geneetilised modifikatsioonid muudavad need rakud ideaalseks mudeliks stabiilse raku transfektsiooni katsete jaoks, mis võimaldab teadlastel sisestada võõrast geneetilist materjali ja uurida geenifunktsioone, valkude vastastikmõju ja geneetiliste modifikatsioonide tagajärgi. Lisaks sellele on üha enam tunnustatud nende kasutamist 3D rakukultuurides, mis annab ülevaate rakkude ja rakkude vastastikmõjudest, kudede morfogeneesist ja haiguste modelleerimisest suurema füsioloogilise tähtsusega, laiendades seeläbi nende kasulikkust traditsioonilistest 2D-kultuuridest kaugemale.

Kude
Rinnanäärme
Haigus
Hiire rinnanäärme pahaloomulised kasvajad
Sünonüümid
  • C-127

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
C127 (Cytioni katalooginumber 305169)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
RIII