Preskoči na vsebino
C127
Tkivo
Mlečna žleza
Bolezen
Maligne novotvorbe mlečne žleze miši
Sinonimi
C-127

Dokumenti

C127

Cell line · Številka izdelka 305169

Celice C127, ki izvirajo iz epitelijskega tkiva mišjih mlečnih žlez, so nepogrešljiva linija sesalskih celic, ki zagotavlja trdno podlago za številne raziskave...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

C127 celice, ki izvirajo iz epitelijskih tkiv sesalcev, so nepogrešljiva celična linija sesalcev, ki predstavlja trdno podlago za številne biološke študije. Te celice so bile podvržene strogemu postopku inženiringa, ki vključuje okužbo s posebej zasnovanimi virusi, ki v njihov genom integrirajo polimerazo RNK T7, ki jo poganja virusni promotor. Prilagodljivost celic C127 se dodatno poveča z vnosom dodatnega rekombinantnega virusa, ki nosi cDNA regulatorja transmembranske prevodnosti cistične fibroze (CFTR) pod nadzorom promotorja T7, ali pa s transfekcijo plazmida z istim promotorjem. Ta genetska postavitev omogoča natančen nadzor nad izražanjem beljakovin, ki je prilagojen proizvodnji specifičnih beljakovin, zaradi česar so celice C127 izjemno orodje za študije izražanja beljakovin.

Epitelijska narava celic C127, ki odraža njihov izvor iz tkiva mlečne žleze, omogoča njihovo adherentno rast. Izkazujejo hitro razmnoževanje in jih je mogoče uporabiti za preučevanje celičnih procesov, rasti in diferenciacije v različnih eksperimentalnih pogojih. Zaradi edinstvenih genskih modifikacij, ki so prisotne v teh celicah, so idealen model za poskuse stabilne transfekcije celic, kar raziskovalcem omogoča vstavljanje tujega genskega materiala in raziskovanje delovanja genov, interakcij proteinov in posledic genskih modifikacij. Poleg tega je njihova uporaba v 3D celičnih kulturah vedno bolj prepoznavna, saj omogoča vpogled v interakcije med celicami, morfogenezo tkiv in modeliranje bolezni z večjo fiziološko pomembnostjo, s čimer se njihova uporabnost razširi prek tradicionalnih 2D kultur.

Tkivo
Mlečna žleza
Bolezen
Maligne novotvorbe mlečne žleze miši
Sinonimi
  • C-127

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
C127 (kataloška številka Cytion 305169)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_6550

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
RIII