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Células BT-549
Tissue
Seio, glândula mamária
Disease
Carcinoma ductal invasivo
Metastatic site
Ductal
Synonyms
BT 549, BT.549, BT549

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Células BT-549

Cell line · Product number 300132

BT-549 cells are a human breast cancer cell line derived from the mammary gland tissue of a 72-year-old Caucasian woman with ductal carcinoma. They are co...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

As células BT-549 são uma linhagem celular de câncer de mama humano derivada do tecido da glândula mamária de uma mulher caucasiana de 72 anos com carcinoma ductal. Elas são comumente utilizadas na pesquisa sobre o câncer para estudar a biologia e o tratamento do câncer de mama, particularmente o subtipo triplo-negativo, que não apresenta expressão do receptor de estrogênio, do receptor de progesterona e do HER2.

As células BT-549 são caracterizadas por sua morfologia epitelial e são conhecidas por suas propriedades altamente invasivas, o que as torna um modelo valioso para o estudo da metástase e da invasão tumoral. Elas apresentam várias características distintivas, incluindo a presença de gotículas lipídicas no citoplasma e uma expressão robusta da proteína mucina-1. Essas células também expressam vários oncogenes e genes supressores de tumor relevantes para a patologia do câncer de mama, como TP53 e RB1.

A linhagem celular BT-549 é negativa para o receptor de estrogênio e para o receptor de progesterona e não apresenta amplificação de HER2, o que a classifica no subtipo de câncer de mama triplo-negativo (TNBC). Devido a essa classificação, as células BT-549 são particularmente úteis para o estudo dos mecanismos únicos de progressão e resposta ao tratamento no TNBC, que é conhecido por sua natureza agressiva e pela falta de terapias direcionadas.

Além disso, as células BT-549 são frequentemente utilizadas em estudos de resistência a medicamentos e para testar novos agentes quimioterápicos e terapias direcionadas, oferecendo insights sobre possíveis estratégias terapêuticas para o manejo e tratamento de formas agressivas de câncer de mama.

Tissue
Seio, glândula mamária
Disease
Carcinoma ductal invasivo
Metastatic site
Ductal
Synonyms
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Karyotype
Modo = 74, intervalo = 53 a 140, três cromossomos marcadores

04Identifiers

Citation
BT-549 (número de catálogo da Cytion 300132)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Produto da frequência fenotípica: 0,0048
Mutational profile
Mutação no TP53

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm² formará uma camada confluente em cerca de 4 dias
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
72 anos
Ethnicity
caucasiano