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BT-549 细胞
Cell line · Product number 300132
BT-549 cells are a human breast cancer cell line derived from the mammary gland tissue of a 72-year-old Caucasian woman with ductal carcinoma. They are co...
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01General information
- Description
BT-549 细胞是一种人类乳腺癌细胞系，来源于一名 72 岁白种女性乳腺导管癌患者的乳腺组织。它们通常用于癌症研究，以研究乳腺癌的生物学和治疗，尤其是缺乏雌激素受体、孕激素受体和 HER2 表达的三阴性亚型乳腺癌。
BT-549 细胞具有上皮形态特征，并以其高度侵袭性而闻名，因此是研究转移和肿瘤侵袭的重要模型。它们表现出一些独特的特征，包括细胞质中存在脂滴以及粘蛋白-1 蛋白的大量表达。这些细胞还表达与乳腺癌病理相关的各种癌基因和肿瘤抑制基因，如 TP53 和 RB1。
BT-549 细胞系雌激素受体阴性，孕激素受体阴性，不扩增 HER2，因此被归类为三阴性乳腺癌（TNBC）亚型。由于这种分类，BT-549 细胞特别适用于研究 TNBC 的独特进展机制和治疗反应，TNBC 以其侵袭性和缺乏靶向疗法而著称。
此外，BT-549 细胞还经常被用于耐药性研究以及测试新的化疗药物和靶向疗法，为管理和治疗侵袭性乳腺癌的潜在治疗策略提供见解。
- Tissue
- 乳房、乳腺
- Disease
- 浸润性导管癌
- Metastatic site
- 导管
- Synonyms
- BT 549
- BT.549
- BT549
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Karyotype
- 模式 = 74，范围 = 53 至 140，三条标记染色体
04Identifiers
- Citation
- BT-549（Cytion 目录号 300132）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1092
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- G6PD，B，PGM1，2，PGM3，1，ES-D，1，Me-2，1，AK-1，1，GLO-1，1-2，表型频率乘积： 0.0048
- Mutational profile
- TP53 突变
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 72 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes