Skip to content
เซลล์ BT-549
Tissue
เต้านม, ต่อมน้ำนม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
Metastatic site
ท่อ
Synonyms
BT 549, BT.549, BT549

Documents

เซลล์ BT-549

Cell line · Product number 300132

BT-549 cells are a human breast cancer cell line derived from the mammary gland tissue of a 72-year-old Caucasian woman with ductal carcinoma. They are co...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ BT-549 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งเต้านมของมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้อเยื่อต่อมน้ำนมของสตรีชาวคอเคเซียนอายุ 72 ปีที่เป็นมะเร็งท่อน้ำนมชนิดลุกลาม เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็งเพื่อศึกษาชีววิทยาและการรักษาโรคมะเร็งเต้านม โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกลุ่มย่อยชนิดทริปเปิลเนกาทีฟ ซึ่งขาดการแสดงออกของตัวรับฮอร์โมนเอสโตรเจน ตัวรับโปรเจสเตอโรน และ HER2

เซลล์ BT-549 มีลักษณะเด่นทางสัณฐานวิทยาเป็นเซลล์เยื่อบุผิว และเป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณสมบัติการรุกรานสูง ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการแพร่กระจายและการรุกรานของเนื้องอก เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะเฉพาะหลายประการ รวมถึงการมีหยดไขมันในไซโตพลาสซึมและการแสดงออกของโปรตีนมิวซิน-1 อย่างเข้มข้น เซลล์เหล่านี้ยังแสดงออกของยีนก่อมะเร็งและยีนกดการเจริญเติบโตของเนื้องอกหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับความผิดปกติของมะเร็งเต้านม เช่น TP53 และ RB1

เซลล์ไลน์ BT-549 เป็นลบต่อตัวรับเอสโตรเจน (estrogen receptor-negative) เป็นลบต่อตัวรับโปรเจสเตอโรน (progesterone receptor-negative) และไม่เพิ่มปริมาณ HER2 จึงจัดอยู่ในกลุ่มมะเร็งเต้านมชนิดทริปเปิลเนกาทีฟ (triple-negative breast cancer: TNBC) เนื่องจากการจำแนกประเภทนี้ เซลล์ BT-549 จึงมีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาวิถีการดำเนินโรคและการตอบสนองต่อการรักษาที่เป็นเอกลักษณ์ใน TNBC ซึ่งเป็นมะเร็งเต้านมที่ขึ้นชื่อเรื่องความรุนแรงและขาดการรักษาแบบมุ่งเป้า

นอกจากนี้ เซลล์ BT-549 ยังถูกนำมาใช้บ่อยในการศึกษาความต้านทานต่อยา และการทดสอบสารเคมีบำบัดใหม่ ๆ รวมถึงการบำบัดแบบมุ่งเป้า ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลยุทธ์การรักษาที่อาจนำมาใช้ในการจัดการและรักษาโรคมะเร็งเต้านมชนิดรุนแรง

Tissue
เต้านม, ต่อมน้ำนม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
Metastatic site
ท่อ
Synonyms
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Karyotype
โหมด = 74, ช่วง = 53 ถึง 140, โครโมโซมเครื่องหมายสามตัว

04Identifiers

Citation
BT-549 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300132)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.0048
Mutational profile
การกลายพันธุ์ของ TP53

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม. จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ในเวลาประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
72 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน