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BT-549 細胞
Tissue
乳房、乳腺
Disease
侵襲性導管癌
Metastatic site
導管性
Synonyms
BT 549, BT.549, BT549

Documents

BT-549 細胞

Cell line · Product number 300132

BT-549 cells are a human breast cancer cell line derived from the mammary gland tissue of a 72-year-old Caucasian woman with ductal carcinoma. They are co...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

BT-549 細胞是一種源自一名 72 歲白人女性乳腺導管癌患者乳腺組織的人類乳腺癌細胞系。 該細胞系常被用於癌症研究,以探討乳癌的生物學特性及治療方法,特別是缺乏雌激素受體、黃體素受體及 HER2 表達的「三陰性」亞型。

BT-549 細胞以其上皮形態為特徵,並以其高度侵襲性而聞名,使其成為研究轉移和腫瘤侵襲的寶貴模型。它們表現出若干獨特特徵,包括細胞質中存在脂滴以及強烈的黏蛋白-1 蛋白表達。 這些細胞亦表達與乳癌病理相關的各種致癌基因和抑癌基因,例如 TP53 和 RB1。

BT-549 細胞系為雌激素受體陰性、黃體酮受體陰性,且未出現 HER2 擴增,因此歸類為三陰性乳癌(TNBC)亞型。 基於此分類,BT-549 細胞對於研究三陰性乳癌(TNBC)的獨特進展機制及治療反應尤為有用,此類乳癌以其侵襲性強且缺乏標靶療法而著稱。

此外,BT-549 細胞常被用於藥物抗性研究,以及測試新的化療藥物和標靶療法,有助於深入了解管理及治療侵襲性乳腺癌的潛在治療策略。

Tissue
乳房、乳腺
Disease
侵襲性導管癌
Metastatic site
導管性
Synonyms
  • BT 549
  • BT.549
  • BT549

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣
Karyotype
模式 = 74,範圍 = 53 至 140,三條標記染色體

04Identifiers

Citation
BT-549(Cytion 型號 300132)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1092

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD、B、PGM1、2、PGM3、1、ES-D、1、Me-2、1、AK-1、1、GLO-1、1-2,表型頻率乘積:0.0048
Mutational profile
TP53 突變

06Handling and culture

Culture medium
DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 個細胞/cm² 約需 4 天即可形成密合的細胞層
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
72年
Ethnicity
高加索人