الانتقال إلى المحتوى
Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)
الأنسجة
الحبل السري - جيلي وارتونز جيلي

المستندات

Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)

Cell line · رقم المنتج 300685

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Wharton's Jelly (HMSC-WJ) represent a unique and versatile subset of mesenchymal stromal cells (MSCs). These cel...

€690.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تمثل الخلايا الجذعية الوسيطة البشرية المشتقة من هلام وارتون (HMSC-WJ) مجموعة فرعية فريدة ومتعددة الاستخدامات من الخلايا الوسيطة اللحمية (MSCs). يتم عزل هذه الخلايا من المادة الهلامية الموجودة داخل الحبل السري، مما يوفر مصدرًا أكثر بدائية للخلايا الجذعية الوسيطة مقارنة بتلك المشتقة من الأنسجة البالغة مثل نخاع العظام أو الأنسجة الدهنية. تساهم هذه الطبيعة البدائية في معدلات تكاثرها الأعلى، ومناعيتها الأقل، وقدرتها على التمايز المحسنة. والجدير بالذكر أن HMSC-WJ يمكن أن تتمايز إلى مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا، بما في ذلك الخلايا الدهنية والخلايا العظمية والخلايا الغضروفية، في ظل ظروف محددة في المختبر، مما يجعلها ذات قيمة عالية للبحث في الطب التجديدي وهندسة الأنسجة والعلاجات الخلوية.

أحد العوامل الرئيسية التي تميز الخلايا الجذعية الوسيطة من الحبل السري (HMSC-WJ) عن الخلايا الجذعية الوسيطة الأخرى هو مصدرها غير الجراحي والمقبول أخلاقياً، حيث يتم التخلص من الحبل السري عادةً بعد الولادة. وهذا يزيل المخاوف الأخلاقية ومعدل الإصابة بالأمراض لدى المتبرعين المرتبطين باستخراج الخلايا الجذعية الوسيطة من نخاع العظم أو الأنسجة الدهنية. علاوة على ذلك، تظهر خلايا HMSC-WJ خصائص مناعية فائقة ومخاطر تحول أقل مقارنة بالخلايا الجذعية الوسيطة من مصادر أخرى، مما يجعلها خيارًا جذابًا لكل من الدراسات المختبرية والتطبيقات العلاجية المحتملة.

يتم حفظ الخلايا الجذعية الوسيطة المتعددة القدرات المزروعة (HMSC-WJ) في مرحلة مبكرة باستخدام وسط تبريد محدد لضمان قابلية عالية للحياة والوظائف عند إذابتها. تحتوي كل أنبوبة تبريد على ما لا يقل عن 1 × 106 خلية، مع مستويات قابلية للحياة تتراوح باستمرار بين 92٪ و 95٪ وفقًا لاختبار استبعاد صبغة تريبان الأزرق. يتم جمع هذه الخلايا من متبرعين أصحاء، وقد قدموا جميعًا موافقة مستنيرة على استخدام خلاياهم. يتم تطبيق إجراءات صارمة لمراقبة الجودة على كل دفعة من HMSC-WJ، لضمان استيفائها لمعايير صارمة للتعريف والنقاء والفعالية والقدرة على البقاء، وبالتالي ضمان ملاءمتها لأغراض البحث.

الأنسجة
الحبل السري - جيلي وارتونز جيلي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
الخلايا الجذعية الوسيطة اللُّحمية البشرية، هلام وارتونز (HMSC-WJ) (كتالوج سيتيون رقم 300685)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606

04التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
Alpha MEM، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث / س: ريبونوكليوسيدات، ث: 1.0 ميلي مولار بيروكليوسيدات الصوديوم: ديوكسي ريبونوكليوسيدات، ث: 1.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و2 نانوغرام/ملل من عامل النمو الجيني الوراثي bFGF
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 80% من FBS + 10% وسط قاعدي + 10% DMSO للحفاظ على الحيوية أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100) للحماية الفائقة بالتبريد، مما يمنع التمايز غير المرغوب فيه مع الحفاظ على تعدد القدرات.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.