Preskoči na vsebino
Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)
Tkivo
Popkovnica - Whartonsov žele

Dokumenti

Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)

Cell line · Številka izdelka 300685

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Wharton's Jelly (HMSC-WJ) represent a unique and versatile subset of mesenchymal stromal cells (MSCs). These cel...

€690.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Človeške mezenhimalne izvorne celice, pridobljene iz Whartonove želatine (HMSC-WJ), predstavljajo edinstveno in vsestransko podskupino mezenhimalnih stromalnih celic (MSC). Te celice so izolirane iz želatinaste snovi v popkovini in v primerjavi s tistimi, pridobljenimi iz odraslih tkiv, kot sta kostni mozeg ali maščobno tkivo, predstavljajo bolj primitivni vir MSC. Ta primitivna narava prispeva k njihovi višji stopnji proliferacije, nižji imunogenosti in izboljšani sposobnosti diferenciacije. Zlasti se HMSC-WJ lahko diferencirajo v široko paleto celičnih tipov, vključno z adipociti, osteoblasti in hondrociti, pod specifičnimi in vitro pogoji, kar jih naredi zelo dragocene za raziskave na področju regenerativne medicine, tkivnega inženirstva in celičnih terapij.

Ena od ključnih razlik med HMSC-WJ in drugimi MSC je njihov neinvaziven in etično sprejemljiv vir, saj se popkovina po porodu običajno zavrže. To odpravlja etične pomisleke in obolevnost darovalcev, povezano z odvzemom MSC iz kostnega mozga ali maščobnega tkiva. Poleg tega HMSC-WJ kažejo v primerjavi z MSC iz drugih virov boljše imunomodulatorne lastnosti in manjše tveganje za transformacijo, kar jih naredi privlačno možnost za in vitro študije in potencialne terapevtske aplikacije.

Kultivirane HMSC-WJ se krioprezervirajo v zgodnjih fazah s pomočjo posebnega kriomedija, da se zagotovi visoka vitalnost in funkcionalnost po odmrzovanju. Vsaka kriovialka vsebuje najmanj 1 x 106 celic, katerih vitalnost se giblje med 92 % in 95 %, kot je bilo ugotovljeno s testom izključitve barvila Trypan Blue. Te celice so zbrane od zdravih darovalcev, ki so vsi dali soglasje za uporabo svojega celičnega materiala. Za vsako serijo HMSC-WJ se uporabljajo strogi ukrepi za nadzor kakovosti, s čimer se zagotovi, da izpolnjujejo stroga merila za identifikacijo, čistost, moč in vitalnost, kar zagotavlja njihovo primernost za raziskovalne namene.

Tkivo
Popkovnica - Whartonsov žele

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
Človeške mezenhimske matične celice, Whartonsov žele (HMSC-WJ) (kataloška številka Cytion 300685)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606

04Ravnanje in gojenje

Gojišče
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w/o: Ribonukleozidi, w/o: NaHCO3, w: 1,0 mM natrijev piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM deoksiribonukleozidi
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo 80 % FBS + 10 % bazičnega gojišča + 10 % DMSO za ohranjanje viabilnosti ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100) za boljšo krioprotekcijo, ki preprečuje neželeno diferenciacijo in hkrati ohranja pluripotentnost.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.