Ga naar de inhoud
Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)
Weefsel
Navelstreng - Whartons Jelly

Documenten

Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)

Cell line · Productnummer 300685

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Wharton's Jelly (HMSC-WJ) represent a unique and versatile subset of mesenchymal stromal cells (MSCs). These cel...

€690.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Menselijke mesenchymale stamcellen afkomstig uit Wharton's Jelly (HMSC-WJ) vormen een unieke en veelzijdige subgroep van mesenchymale stromale cellen (MSC's). Deze cellen worden geïsoleerd uit de gelatineachtige substantie in de navelstreng en vormen een meer primitieve bron van MSC's in vergelijking met cellen afkomstig uit volwassen weefsels zoals beenmerg of vetweefsel. Deze primitieve aard draagt bij aan hun hogere proliferatiesnelheid, lagere immunogeniciteit en verbeterd differentiatiepotentieel. Opvallend is dat HMSC-WJ onder specifieke in-vitro-omstandigheden kan differentiëren tot een breed scala aan celtypen, waaronder adipocyten, osteoblasten en chondrocyten, waardoor ze zeer waardevol zijn voor onderzoek naar regeneratieve geneeskunde, weefselengineering en celtherapieën.

Een van de belangrijkste verschillen tussen HMSC-WJ en andere MSC's is hun niet-invasieve en ethisch verantwoorde bron, aangezien de navelstreng doorgaans na de geboorte wordt weggegooid. Dit elimineert de ethische bezwaren en morbiditeit bij donoren die gepaard gaan met het oogsten van MSC's uit beenmerg of vetweefsel. Bovendien vertonen HMSC-WJ superieure immuunmodulerende eigenschappen en een lager risico op transformatie in vergelijking met MSC's uit andere bronnen, waardoor ze een aantrekkelijke optie zijn voor zowel in-vitro-onderzoek als potentiële therapeutische toepassingen.

De gekweekte HMSC-WJ worden in vroege passages cryopreserveerd met behulp van een specifiek cryomedium om een hoge levensvatbaarheid en functionaliteit bij ontdooiing te garanderen. Elk cryovial bevat minimaal 1 x 106 cellen, met een levensvatbaarheid die consistent varieert tussen 92% en 95%, zoals bepaald door de Trypan Blue-kleurstofuitsluitingstest. Deze cellen worden verzameld van gezonde donoren, die allemaal geïnformeerde toestemming hebben gegeven voor het gebruik van hun celmateriaal. Elke batch HMSC-WJ wordt onderworpen aan strenge kwaliteitscontroles om te garanderen dat ze voldoen aan strenge criteria voor identificatie, zuiverheid, potentie en levensvatbaarheid, waardoor ze geschikt zijn voor onderzoeksdoeleinden.

Weefsel
Navelstreng - Whartons Jelly

02Classificatie

Organisme
Mens
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
Menselijke Mesenchymale Stamcellen, Whartons Jelly (HMSC-WJ) (Cytion catalogusnummer 300685)
NCBI-belastingnummer
9606

04Behandeling en kweek

Kweekmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w/o: Ribonucleosiden, w/o: Deoxyribonucleosiden, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 80% FBS + 10% basaalmedium + 10% DMSO om de levensvatbaarheid te behouden, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) voor superieure cryoprotectie, waarbij ongewenste differentiatie wordt voorkomen terwijl de pluripotentie behouden blijft.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.