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Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)
Pañuelo de papel
Cordón umbilical - Jalea Whartons

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Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)

Cell line · Número de producto 300685

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Wharton's Jelly (HMSC-WJ) represent a unique and versatile subset of mesenchymal stromal cells (MSCs). These cel...

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1

01Información general

Descripción

Las células madre mesenquimales humanas derivadas de la gelatina de Wharton (HMSC-WJ) representan un subconjunto único y versátil de células estromales mesenquimales (MSC). Estas células se aíslan de la sustancia gelatinosa del cordón umbilical, lo que las convierte en una fuente más primitiva de MSC en comparación con las derivadas de tejidos adultos como la médula ósea o el tejido adiposo. Esta naturaleza primitiva contribuye a sus mayores tasas de proliferación, menor inmunogenicidad y mayor potencial de diferenciación. Cabe destacar que las HMSC-WJ pueden diferenciarse en una amplia variedad de tipos de células, incluidos adipocitos, osteoblastos y condrocitos, en condiciones in vitro específicas, lo que las hace muy valiosas para la investigación en medicina regenerativa, ingeniería de tejidos y terapias celulares.

Una de las principales diferencias entre las HMSC-WJ y otras MSC es su origen no invasivo y éticamente favorable, ya que el cordón umbilical se desecha normalmente después del parto. Esto elimina las preocupaciones éticas y la morbilidad del donante asociadas a la obtención de MSC de la médula ósea o el tejido adiposo. Además, las HMSC-WJ demuestran propiedades inmunomoduladoras superiores y un menor riesgo de transformación en comparación con las MSC de otras fuentes, lo que las convierte en una opción atractiva tanto para estudios in vitro como para posibles aplicaciones terapéuticas.

Las HMSC-WJ cultivadas se criopreservan en pases tempranos utilizando un criomedio específico para garantizar una alta viabilidad y funcionalidad tras la descongelación. Cada criovial contiene un mínimo de 1 x 106 células, con niveles de viabilidad que oscilan constantemente entre el 92 % y el 95 %, según lo determinado por la prueba de exclusión con azul de tripano. Estas células se obtienen de donantes sanos, todos los cuales han dado su consentimiento informado para el uso de su material celular. Se aplican rigurosas medidas de control de calidad a cada lote de HMSC-WJ, lo que garantiza que cumplen estrictos criterios de identificación, pureza, potencia y viabilidad, lo que garantiza su idoneidad para fines de investigación.

Pañuelo de papel
Cordón umbilical - Jalea Whartons

02Clasificación

Organismo
Humano
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
Células madre mesenquimales humanas, gelatina de Whartons (HMSC-WJ) (número de catálogo de Cytion 300685)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

04Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM alfa, con: 2,0 mM de glutamina estable, sin Ribonucleósidos, w/o: Desoxirribonucleósidos, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2g/L NaHCO3
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos 80% FBS + 10% medio basal + 10% DMSO para mantener la viabilidad, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion) para una crioprotección superior, evitando la diferenciación no deseada y preservando la pluripotencia.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.