Przejdź do treści
Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)
Chusteczka
Pępowina - galaretka Whartonsa

Dokumenty

Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)

Cell line · Numer produktu 300685

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Wharton's Jelly (HMSC-WJ) represent a unique and versatile subset of mesenchymal stromal cells (MSCs). These cel...

€690.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Ludzkie mezenchymalne komórki macierzyste pochodzące z galaretki Whartona (HMSC-WJ) stanowią wyjątkową i wszechstronną podgrupę mezenchymalnych komórek macierzystych (MSC). Komórki te są izolowane z galaretowatej substancji znajdującej się w pępowinie, stanowiąc bardziej prymitywne źródło MSC w porównaniu z komórkami pochodzącymi z tkanek dorosłych, takich jak szpik kostny lub tkanka tłuszczowa. Ta prymitywna natura przyczynia się do ich wyższych wskaźników proliferacji, niższej immunogenności i zwiększonego potencjału różnicowania. Co ważne, HMSC-WJ mogą różnicować się w wiele różnych typów komórek, w tym adipocyty, osteoblasty i chondrocyty, w określonych warunkach in vitro, co czyni je bardzo cennymi w badaniach nad medycyną regeneracyjną, inżynierią tkankową i terapiami komórkowymi.

Jednym z kluczowych czynników odróżniających HMSC-WJ od innych MSC jest ich nieinwazyjne i etycznie korzystne źródło, ponieważ pępowina jest zazwyczaj wyrzucana po porodzie. Eliminuje to obawy etyczne i zachorowalność dawców związane z pobieraniem MSC ze szpiku kostnego lub tkanki tłuszczowej. Ponadto HMSC-WJ wykazują lepsze właściwości immunomodulujące i mniejsze ryzyko transformacji w porównaniu z MSC pochodzącymi z innych źródeł, co czyni je atrakcyjną opcją zarówno do badań in vitro, jak i potencjalnych zastosowań terapeutycznych.

Hodowane HMSC-WJ są kriokonserwowane we wczesnych pasażach przy użyciu specjalnego kriomedium, aby zapewnić wysoką żywotność i funkcjonalność po rozmrożeniu. Każda krioprobówka zawiera co najmniej 1 x 106 komórek, a poziom żywotności wynosi stale od 92% do 95%, zgodnie z wynikiem testu wykluczenia barwnikiem Trypan Blue. Komórki te są pobierane od zdrowych dawców, którzy wyrazili świadomą zgodę na wykorzystanie swojego materiału komórkowego. Każda partia HMSC-WJ podlega rygorystycznej kontroli jakości, która gwarantuje, że spełniają one surowe kryteria identyfikacji, czystości, mocy i żywotności, a tym samym są odpowiednie do celów badawczych.

Chusteczka
Pępowina - galaretka Whartonsa

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
Ludzkie mezenchymalne komórki macierzyste, galaretka Whartonsa (HMSC-WJ) (numer katalogowy Cytion 300685)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w/o: Rybonukleozydy, w/o: Deoksyrybonukleozydy, w: 1.0 mM Pirogronian sodu, w: 2.2g/L NaHCO3
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 80% FBS + 10% pożywki podstawowej + 10% DMSO w celu utrzymania żywotności lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100) dla lepszej krioprotekcji, zapobiegając niepożądanemu różnicowaniu przy jednoczesnym zachowaniu pluripotencji.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.