Pāriet uz saturu
Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)
Audums
Pūpols - Whartons Jelly

Dokumenti

Human Mesenchymal Stem Cells, Whartons Jelly (HMSC-WJ)

Cell line · Preces numurs 300685

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Wharton's Jelly (HMSC-WJ) represent a unique and versatile subset of mesenchymal stromal cells (MSCs). These cel...

€690.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

No Wharton's Jelly iegūtas cilvēka mesenchimālās cilmes šūnas (HMSC-WJ) ir unikāla un daudzpusīga mesenchimālo stromas šūnu (MSC) apakšgrupa. Šīs šūnas tiek izdalītas no nabassaites gēlveida vielas, kas ir primitīvāks MSC avots salīdzinājumā ar šūnām, kas iegūtas no pieaugušo audiem, piemēram, kaulu smadzenēm vai taukaudos. Šī primitīvā daba veicina to augstāku proliferācijas ātrumu, zemāku imunogenitāti un uzlabotu diferenciācijas potenciālu. Jāatzīmē, ka HMSC-WJ var diferenciēties dažādos šūnu tipos, tostarp adipocītos, osteoblastos un hondrocītos, specifiskos in vitro apstākļos, padarot tās ļoti vērtīgas pētījumos reģeneratīvajā medicīnā, audu inženierijā un šūnu terapijās.

Viena no galvenajām HMSC-WJ atšķirībām no citām MSC ir to neinvazīvais un ētiski pieņemamais avots, jo nabassaites parasti tiek izmestas pēc dzimšanas. Tas novērš ētiskās bažas un donoru saslimstību, kas saistīta ar MSC ieguvi no kaulu smadzenēm vai taukaudos. Turklāt HMSC-WJ uzrāda labākas imūnmodulējošas īpašības un mazāku transformācijas risku salīdzinājumā ar MSC no citiem avotiem, padarot tos par pievilcīgu izvēli gan in vitro pētījumiem, gan potenciālām terapeitiskām lietojumiem.

Kultivētās HMSC-WJ tiek kriokonservētas agrīnās stadijās, izmantojot īpašu kriomediju, lai nodrošinātu augstu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas. Katrs kriovials satur vismaz 1 x 106 šūnas, kuru dzīvotspēja ir stabili no 92% līdz 95%, kā noteikts ar Trypan Blue krāsvielas izslēgšanas testu. Šīs šūnas tiek ievāktas no veseliem donoriem, kuri visi ir devuši informētu piekrišanu savu šūnu materiāla izmantošanai. Katrai HMSC-WJ partijai tiek piemēroti stingri kvalitātes kontroles pasākumi, nodrošinot, ka tās atbilst stingriem identifikācijas, tīrības, iedarbīguma un dzīvotspējas kritērijiem, tādējādi garantējot to piemērotību pētniecības nolūkiem.

Audums
Pūpols - Whartons Jelly

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
Cilvēka mezenhimālās cilmes šūnas, Whartons Jelly (HMSC-WJ) (Cytion kataloga numurs 300685)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w/o: Ribonukleozīdi, w/o: Deoksiribonukleozīdi, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā krioprezervēšanas barotni mēs izmantojam 80 % FBS + 10 % bāzes barotni + 10 % DMSO, lai saglabātu dzīvotspēju, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas nodrošina labāku krioprotekciju, novēršot nevēlamu diferenciāciju, vienlaikus saglabājot pluripotenci.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.