Премини към съдържанието
Клетки A172
Тъкан
Мозък
Заболяване
Глиобластом
Място на метастазите
Място на първичния тумор (мозък)
Синоними
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Документи

Клетки A172

Cell line · Номер на продукта 300108

A-172 (A172 или A-172 MG) е важна клетъчна линия, използвана в изследванията в областта на неврологията. Тя произхожда от мозъчната тъкан на 53-годишен мъж с глиобласт...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Изработва се по поръчка
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

A-172 (A172 или A-172 MG) е важна клетъчна линия, използвана в неврологичните изследвания. Тя произхожда от мозъчната тъкан на 53-годишен мъж с глиобластом - вид рак на мозъка. Тези клетки прилепват и се разпространяват по повърхността на блюдата за култивиране, като кариотипът им е n = 80 (80 хромозоми). Клетките А-172 са хипертриплоидни, с над 20 маркерни хромозоми. Доказано е, че те не са туморогенни при третирани с антитимоцитен серум мишки от NIH Swiss. Клетките A-172 имат профил на генна експресия, който подчертава мезенхимната им линия и участието им в ангиогенезата.

Те експресират гени, свързани с мезенхимни маркери (CD90, CD105, протеин за активиране на фибробластите, тенасцин С) и индуктори на ангиогенезата (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, тромбоспондин-1). Сравненията с клетъчната линия T98G разкриват разлики в морфологията и експресията на повърхностните маркери. И двете клетъчни линии показват висока експресия на a2 гладкомускулен актин. Промяната на концентрацията на феталния серум в хранителната среда влияе върху дела на клетките, експресиращи специфични повърхностни антигени, като CD73 и CD105.

Клетъчните линии A-172 и T98G точно представят глиобластомите, като предоставят ценни инструменти за изучаване на този мозъчен тумор. Техните профили на генна експресия и морфологични характеристики позволяват да се изследват молекулярните механизми, които са в основата на развитието и прогресията на глиобластома. Изследователите могат да използват клетките A-172, за да придобият представа за биологията на глиобластома и потенциално да идентифицират нови терапевтични цели за това опустошително заболяване.

Тъкан
Мозък
Заболяване
Глиобластом
Място на метастазите
Място на първичния тумор (мозък)
Приложения
Изследвания върху глиобластомата; биология на мезенхимния ГБМ; проучвания върху ангиогенезата, свързана с VEGF/FGF/TGF-β; инвазия и миграция на глиомите; моделиране на ГБМ с див тип IDH1; тестове за лекарствена чувствителност; модели с ксенографти
Синоними
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиоподобен (глиом)
Тип клетка
Глиални клетки
Плоидност
Анеуплоидни
Статус на MSI
Стабилен (MSS)
Време за удвояване
40 часа

04Идентификатори

Източник
A172 (каталожен номер 300108 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0131

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
Няма мутация на IDH1

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2 ще доведе до конфлуентен монослой в рамките на 3 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 4 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 до 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
53 години
Етническа принадлежност
Кавказки