Skip to content
A172 เซลล์
Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Metastatic site
ตำแหน่งของเนื้องอกหลัก (สมอง)
Synonyms
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Documents

A172 เซลล์

Cell line · Product number 300108

A-172 (A172 or A-172 MG) is a significant cell line used in neuroscience research. It originates from the brain tissue of a 53-year-old male with glioblas...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A-172 (A172 หรือ A-172 MG) เป็นเซลล์ไลน์ที่มีความสำคัญใช้ในการวิจัยทางประสาทวิทยา มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อสมองของชายอายุ 53 ปีที่เป็นโรคกลีโอโบสโตมา ซึ่งเป็นชนิดหนึ่งของมะเร็งสมอง เซลล์เหล่านี้สามารถเกาะติดและแพร่กระจายบนผิวของจานเพาะเลี้ยง โดยมีคารีโอไทป์ n = 80 (80 โครโมโซม)เซลล์ A-172 เป็นเซลล์ที่มีโครโมโซมเกินสามชุด (hypertriploid) โดยมีโครโมโซมเครื่องหมายมากกว่า 20 โครโมโซม เซลล์เหล่านี้ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนู NIH Swiss ที่ได้รับซีรัมต้านทีเซลล์ (anti-thymocyte serum) เซลล์ A-172 มีลักษณะการแสดงออกของยีนที่เน้นถึงสายพันธุ์เมเซนไคม์ (mesenchymal lineage) และการมีส่วนร่วมในกระบวนการสร้างหลอดเลือดใหม่ (angiogenesis)

พวกเขาแสดงยีนที่เกี่ยวข้องกับตัวบ่งชี้เมเซนไคมัล (CD90, CD105, โปรตีนกระตุ้นไฟโบรบลาสต์, เทนาซิน C) และตัวเหนี่ยวนำการสร้างหลอดเลือดใหม่ (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, ทรอมโบสปอนดิน-1) การเปรียบเทียบกับเซลล์ไลน์ T98G แสดงให้เห็นความแตกต่างในรูปร่างและลักษณะการแสดงออกของตัวบ่งชี้ผิวเซลล์ ทั้งสองเซลล์ไลน์แสดงการแสดงออกสูงของแอคตินกล้ามเนื้อเรียบ a2การเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของซีรัมทารกในครรภ์ในอาหารเลี้ยงเชื้อส่งผลต่อสัดส่วนของเซลล์ที่แสดงแอนติเจนบนผิวเซลล์เฉพาะ เช่น CD73 และ CD105

เซลล์ไลน์ A-172 และ T98G แสดงลักษณะของเนื้องอกสมองชนิดกลิโอบลาสโตมาได้อย่างแม่นยำ เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเนื้องอกสมองชนิดนี้ โปรไฟล์การแสดงออกของยีนและลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เหล่านี้ช่วยให้สามารถศึกษาเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเกิดและการลุกลามของกลิโอบลาสโตมา นักวิจัยสามารถใช้เซลล์ A-172 เพื่อทำความเข้าใจชีววิทยาของกลิโอบลาสโตมาและอาจค้นพบเป้าหมายใหม่สำหรับการรักษาโรคที่ร้ายแรงนี้

Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Metastatic site
ตำแหน่งของเนื้องอกหลัก (สมอง)
Applications
การวิจัยเกี่ยวกับกลีโอโบลาสโตมา; ชีววิทยาของ GBM แบบมีสเต็มเซลล์; การศึกษาการสร้างหลอดเลือดโดย VEGF/FGF/TGF-β; การรุกรานและการแพร่กระจายของกลีโอมา; การจำลองแบบ GBM ที่มี IDH1 ชนิดปกติ; การทดสอบความไวต่อยา; แบบจำลอง xenograft
Synonyms
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว (เนื้องอกสมองชนิดกลีโอมา)
Cell type
เซลล์เกลีย
Ploidy status
อะนีพลอยด์
MSI status
เสถียร (MSS)
Doubling time
40 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
A172 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300108)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Expression and susceptibility

Mutational profile
ไม่มีการกลายพันธุ์ของ IDH1

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเซลล์เดียวที่หนาแน่นภายใน 3 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 4 x 104 เซลล์/ซม.² และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ถึง 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
53 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน