Přejít na obsah
A172 Buňky
Tkáň
Mozek
Nemoc
Glioblastom
Místo metastázy
Místo primárního nádoru (mozek)
Synonyma
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Dokumenty

A172 Buňky

Cell line · Číslo výrobku 300108

A-172 (A172 nebo A-172 MG) je významná buněčná linie používaná ve výzkumu neurovědy. Pochází z mozkové tkáně 53letého muže s glioblastomem...

€430.00bez DPH a poštovného
Na zakázku
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

A-172 (A172 nebo A-172 MG) je významná buněčná linie používaná v neurovědním výzkumu. Pochází z mozkové tkáně 53letého muže s glioblastomem, což je typ rakoviny mozku. Tyto buňky přiléhají a šíří se na povrchu kultivačních misek, jejich karyotyp je n = 80 (80 chromozomů). Buňky A-172 jsou hypertriploidní a vykazují více než 20 markerových chromozomů. Bylo prokázáno, že u myší NIH Swiss, kterým bylo podáno antithymocytární sérum, nejsou nádorové. Buňky A-172 mají profil genové exprese, který zdůrazňuje jejich mezenchymální linii a zapojení do angiogeneze.

Exprimují geny související s mezenchymálními markery (CD90, CD105, fibroblastový aktivační protein, tenascin C) a induktory angiogeneze (VEGF, FGF2(b), TGFb1, trombospondin-1). Srovnání s buněčnou linií T98G ukazuje rozdíly v morfologii a expresi povrchových markerů. Obě buněčné linie vykazují vysokou expresi a2 hladkosvalového aktinu. Změna koncentrace fetálního séra v kultivačním médiu ovlivňuje podíl buněk exprimujících specifické povrchové antigeny, jako jsou CD73 a CD105.

Buněčné linie A-172 a T98G přesně reprezentují glioblastomy a poskytují cenné nástroje pro studium tohoto mozkového nádoru. Jejich profily genové exprese a morfologické vlastnosti umožňují zkoumat molekulární mechanismy, které jsou základem vývoje a progrese glioblastomu. Vědci mohou využít buňky A-172 k získání poznatků o biologii glioblastomu a potenciálně identifikovat nové terapeutické cíle pro toto devastující onemocnění.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Glioblastom
Místo metastázy
Místo primárního nádoru (mozek)
Aplikace
Výzkum glioblastomu; biologie mezenchymálního GBM; studie angiogeneze VEGF/FGF/TGF-β; invaze a migrace gliomů; modelování GBM s divokým typem IDH1; testy citlivosti na léčiva; modely xenotransplantátů
Synonyma
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelový typ (gliom)
Typ buňky
Gliové buňky
Ploidní stav
Aneuploidní
Stav MSI
Stabilní (MSS)
Doba zdvojnásobení
40 hodin

04Identifikátory

Citace
A172 (katalogové číslo Cytion 300108)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Nemá mutaci IDH1

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří do 3 dnů konfluentní monovrstvu.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 4 x 104 buněk/cm2 a nechte je zotavit se z procesu zmrazení a přilnout po dobu nejméně 24 až 48 hodin.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
53 let
Etnická příslušnost
Kavkazský