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Células A172
Tissue
Cerebro
Disease
Glioblastoma
Metastatic site
Localización del tumor primario (cerebro)
Synonyms
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

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Células A172

Cell line · Product number 300108

A-172 (A172 or A-172 MG) is a significant cell line used in neuroscience research. It originates from the brain tissue of a 53-year-old male with glioblas...

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01General information

Description

La A-172 (A172 o A-172 MG) es una línea celular importante que se utiliza en la investigación en neurociencia. Proviene del tejido cerebral de un hombre de 53 años con glioblastoma, un tipo de cáncer cerebral. Estas células se adhieren y se propagan en la superficie de las placas de cultivo, con un cariotipo de n = 80 (80 cromosomas). Las células A-172 son hipertriploides y presentan más de 20 cromosomas marcadores. Se ha demostrado que no son tumorigénicas en ratones NIH Swiss tratados con suero antitimocítico. Las células A-172 tienen un perfil de expresión génica que destaca su linaje mesenquimal y su participación en la angiogénesis.

Expresan genes relacionados con marcadores mesenquimales (CD90, CD105, proteína de activación de fibroblastos, tenascina C) e inductores de la angiogénesis (VEGF, FGF2 (b), TGF-β1, trombospondina-1). Las comparaciones con la línea celular T98G revelan diferencias en la morfología y la expresión de marcadores de superficie. Ambas líneas celulares muestran una alta expresión de actina alfa-2 del músculo liso. La modificación de la concentración de suero fetal en el medio de cultivo afecta la proporción de células que expresan antígenos de superficie específicos, como CD73 y CD105.

Las líneas celulares A-172 y T98G representan con precisión los glioblastomas, lo que las convierte en herramientas valiosas para el estudio de este tumor cerebral. Sus perfiles de expresión génica y características morfológicas permiten investigar los mecanismos moleculares subyacentes al desarrollo y la progresión del glioblastoma. Los investigadores pueden utilizar las células A-172 para obtener información sobre la biología del glioblastoma y, potencialmente, identificar nuevas dianas terapéuticas para esta devastadora enfermedad.

Tissue
Cerebro
Disease
Glioblastoma
Metastatic site
Localización del tumor primario (cerebro)
Applications
Investigación sobre el glioblastoma; biología del GBM mesenquimal; estudios sobre la angiogénesis mediada por VEGF, FGF y TGF-β; invasión y migración del glioma; modelización del GBM con IDH1 de tipo salvaje; ensayos de sensibilidad a fármacos; modelos de xenoinjertos
Synonyms
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial (glioma)
Cell type
Células gliales
Ploidy status
Aneuploide
MSI status
Estable (MSS)
Doubling time
40 horas

04Identifiers

Citation
A172 (número de catálogo de Cytion 300108)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Expression and susceptibility

Mutational profile
No presenta mutación en el gen IDH1

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Split ratio
Del 1 al 5
Seeding density
1 x 10⁴ células/cm² dará como resultado una monocapa confluente en un plazo de 3 días.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Post-thaw recovery
Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 4 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 a 48 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
53 años
Ethnicity
caucásico