Preskoči na vsebino
A172 celice
Tkivo
Možgani
Bolezen
Glioblastom
Mesto metastaze
Lokacija primarnega tumorja (možgani)
Sinonimi
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Dokumenti

A172 celice

Cell line · Številka izdelka 300108

A-172 (A172 ali A-172 MG) je pomembna celična linija, ki se uporablja v raziskavah na področju nevroznanosti. Izvira iz možganskega tkiva 53-letnega moškega z glioblastomom...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

A-172 (A172 ali A-172 MG) je pomembna celična linija, ki se uporablja v nevroznanstvenih raziskavah. Izvira iz možganskega tkiva 53-letnega moškega z glioblastomom, vrsto možganskega raka. Te celice se oprijemajo in širijo po površini posodic za gojenje, njihov kariotip pa je n = 80 (80 kromosomov). Celice A-172 so hipertriploidne in imajo več kot 20 označevalnih kromosomov. Pokazalo se je, da pri miših NIH Swiss, zdravljenih s serumom proti timocitom, niso tumorogene. Celice A-172 imajo profil izražanja genov, ki poudarja njihovo mezenhimsko linijo in vključenost v angiogenezo.

Izražajo gene, povezane z mezenhimskimi označevalci (CD90, CD105, protein za aktivacijo fibroblastov, tenascin C) in induktorji angiogeneze (VEGF, FGF2(b), TGFb1, trombospondin-1). Primerjave s celično linijo T98G kažejo razlike v morfologiji in izražanju površinskih označevalcev. Obe celični liniji kažeta visoko izražanje a2 gladkomišičnega aktina. Sprememba koncentracije fetalnega seruma v gojišču vpliva na delež celic, ki izražajo specifične površinske antigene, kot sta CD73 in CD105.

Celični liniji A-172 in T98G natančno predstavljata glioblastome in zagotavljata dragoceno orodje za preučevanje tega možganskega tumorja. Njuni profili izražanja genov in morfološke značilnosti omogočajo raziskave molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za razvoj in napredovanje glioblastoma. Raziskovalci lahko celice A-172 uporabijo za vpogled v biologijo glioblastoma in morebitno opredelitev novih terapevtskih ciljev za to uničujočo bolezen.

Tkivo
Možgani
Bolezen
Glioblastom
Mesto metastaze
Lokacija primarnega tumorja (možgani)
Uporaba
Raziskave glioblastoma; biologija mezenhimalnega GBM; študije angiogeneze VEGF/FGF/TGF-β; invazija in migracija glioma; modeliranje GBM z divjim tipom IDH1; testi občutljivosti na zdravila; modeli ksenotransplantatov
Sinonimi
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijsko podoben (gliom)
Vrsta celice
Glialne celice
Ploidnost
Aneuploidni
Stanje MSI
Stabilno (MSS)
Čas podvojitve
40 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
A172 (kataloška številka Cytion 300108)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Nima mutacije IDH1

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v 3 dneh povzročilo konfluentno monosloj.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 4 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 24 do 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
53 let
Etnična pripadnost
Kavkaški