İçeriğe atla
A172 Hücreleri
Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma
Metastaz yeri
Birincil tümörün yeri (beyin)
Eş anlamlılar
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

A172 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300108

A-172 (A172 veya A-172 MG), sinirbilim araştırmalarında kullanılan önemli bir hücre hattıdır. Bu hücre hattı, glioblastom hastası 53 yaşındaki bir erkeğin beyin dokusundan elde edilmiştir...

€430.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

A-172 (A172 veya A-172 MG) sinirbilim araştırmalarında kullanılan önemli bir hücre hattıdır. Bir tür beyin kanseri olan glioblastoma hastası 53 yaşındaki bir erkeğin beyin dokusundan elde edilmiştir. Bu hücreler kültür kaplarının yüzeyine yapışır ve yayılır, karyotipi n = 80'dir (80 kromozom). A-172 hücreleri hipertriploiddir ve 20'den fazla işaret kromozomu sergiler. Anti-timosit serumu ile tedavi edilen NIH Swiss farelerinde tümörijenik olmadıkları gösterilmiştir. A-172 hücreleri, mezenkimal soylarını ve anjiyogenezdeki rollerini vurgulayan bir gen ekspresyon profiline sahiptir.

Mezenkimal belirteçler (CD90, CD105, fibroblast aktivasyon proteini, tenascin C) ve anjiyogenez indükleyicileri (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, trombospondin-1) ile ilgili genleri ifade ederler. T98G hücre hattı ile yapılan karşılaştırmalar morfoloji ve yüzey işaretleyici ekspresyonunda farklılıklar olduğunu ortaya koymaktadır. Her iki hücre hattı da yüksek a2 düz kas aktin ekspresyonu göstermektedir. Kültür ortamındaki fetal serum konsantrasyonunun değiştirilmesi CD73 ve CD105 gibi spesifik yüzey antijenlerini ifade eden hücrelerin oranını etkiler.

A-172 ve T98G hücre hatları glioblastomları doğru bir şekilde temsil ederek bu beyin tümörünü incelemek için değerli araçlar sağlar. Gen ekspresyon profilleri ve morfolojik özellikleri, glioblastoma gelişimi ve ilerlemesinin altında yatan moleküler mekanizmaların araştırılmasına olanak sağlar. Araştırmacılar A-172 hücrelerini glioblastoma biyolojisi hakkında bilgi edinmek ve potansiyel olarak bu yıkıcı hastalık için yeni terapötik hedefler belirlemek için kullanabilirler.

Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma
Metastaz yeri
Birincil tümörün yeri (beyin)
Uygulamalar
Glioblastom araştırmaları; mezenkimal GBM biyolojisi; VEGF/FGF/TGF-β anjiyogenez çalışmaları; gliom invazyonu ve göçü; IDH1 vahşi tip GBM modellemesi; ilaç duyarlılığı testleri; ksenogreft modelleri
Eş anlamlılar
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri (gliom)
Hücre türü
Glial hücreler
Ploidi durumu
Aneuploid
MSI durumu
Kararlı (MSS)
İki katına çıkma süresi
40 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A172 (Cytion katalog numarası 300108)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
IDH1 mutasyonu yok

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2, 3 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözdükten sonra, hücreleri 4 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 ila 48 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
53 yıl
Etnik köken
Kafkas