
- Weefsel
- Hersenen
- Ziekte
- Glioblastoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Locatie van de primaire tumor (hersenen)
- Synoniemen
- A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG
Documenten
A172 Cellen
Cell line · Productnummer 300108
A-172 (A172 of A-172 MG) is een belangrijke cellijn die wordt gebruikt in neurowetenschappelijk onderzoek. Deze is afkomstig van hersenweefsel van een 53-jarige man met glioblas...
Maatwerk / Aanbevelingen
- A172 CellenCell line€430.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
A-172 (A172 of A-172 MG) is een belangrijke cellijn die gebruikt wordt in neurowetenschappelijk onderzoek. Ze is afkomstig uit het hersenweefsel van een 53-jarige man met glioblastoom, een type hersenkanker. Deze cellen hechten zich en verspreiden zich op het oppervlak van kweekschaaltjes, met een karyotype van n = 80 (80 chromosomen). A-172 cellen zijn hypertriploïde, met meer dan 20 markerchromosomen. Er is aangetoond dat ze niet-tumorigeen zijn in met anti-thymocytenserum behandelde NIH Zwitserse muizen. A-172 cellen hebben een genexpressieprofiel dat hun mesenchymale afstamming en betrokkenheid bij angiogenese benadrukt.
Ze brengen genen tot expressie die gerelateerd zijn aan mesenchymale markers (CD90, CD105, fibroblast activatieproteïne, tenascine C) en angiogenese-inductoren (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, trombospondine-1). Vergelijkingen met de T98G cellijn onthullen verschillen in morfologie en oppervlakte marker expressie. Beide cellijnen vertonen een hoge expressie van a2 gladde spier actine. Verandering van de foetale serumconcentratie in het kweekmedium beïnvloedt de proportie cellen die specifieke oppervlakteantigenen tot expressie brengen, zoals CD73 en CD105.
A-172 en T98G cellijnen vertegenwoordigen nauwkeurig glioblastomen en bieden waardevolle hulpmiddelen voor het bestuderen van deze hersentumor. Hun genexpressieprofielen en morfologische kenmerken maken onderzoek mogelijk naar de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling en progressie van glioblastomen. Onderzoekers kunnen A-172 cellen gebruiken om inzicht te krijgen in de biologie van glioblastoom en mogelijk nieuwe therapeutische doelwitten identificeren voor deze verwoestende ziekte.
- Weefsel
- Hersenen
- Ziekte
- Glioblastoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Locatie van de primaire tumor (hersenen)
- Toepassingen
- Onderzoek naar glioblastoom; biologie van mesenchymale GBM; onderzoeken naar angiogenese door VEGF/FGF/TGF-β; invasie en migratie van glioom; modellering van GBM met IDH1-wildtype; tests voor geneesmiddelgevoeligheid; xenotransplantaatmodellen
- Synoniemen
- A-172
- A 172
- A-172 MG
- A-172MG
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- Zonder genetisch gemodificeerde organismen
- Details over de GGO-status
- No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig (glioom)
- Celtype
- Gliale cellen
- Ploïdie
- Aneuploïde
- MSI-status
- Stabiel (MSS)
- Verdubbelingstijd
- 40 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- A172 (Cytion catalogusnummer 300108)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0131
05Expressie en vatbaarheid
- Mutatieprofiel
- Heeft geen IDH1-mutatie
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 5
- Zaaidichtheid
- 1 x 104 cellen/cm2 resulteert binnen 3 dagen in een confluente monolaag.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Herstel na ontdooiing
- Na ontdooien, de cellen uitplaten op 4 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 tot 48 uur laten herstellen van het invriesproces en zich laten hechten.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 53 jaar
- Etnische afkomst
- Kaukasisch
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja