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Cellule A172
Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sito metastatico
Sede del tumore primario (cervello)
Sinonimi
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Documenti

Cellule A172

Cell line · Codice prodotto 300108

La linea cellulare A-172 (A172 o A-172 MG) è una linea cellulare di grande rilevanza utilizzata nella ricerca nel campo delle neuroscienze. Deriva dal tessuto cerebrale di un uomo di 53 anni affetto da glioblastoma...

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01Informazioni generali

Descrizione

A-172 (A172 o A-172 MG) è un'importante linea cellulare utilizzata nella ricerca sulle neuroscienze. Proviene dal tessuto cerebrale di un uomo di 53 anni affetto da glioblastoma, un tipo di cancro al cervello. Queste cellule aderiscono e si diffondono sulla superficie delle piastre di coltura, con un cariotipo di n = 80 (80 cromosomi). Le cellule A-172 sono ipertriploidi, con oltre 20 cromosomi marcatori. È stato dimostrato che non sono tumorigeniche in topi NIH Swiss trattati con siero anti-timociti. Le cellule A-172 hanno un profilo di espressione genica che evidenzia il loro lignaggio mesenchimale e il coinvolgimento nell'angiogenesi.

Esprimono geni correlati a marcatori mesenchimali (CD90, CD105, proteina di attivazione dei fibroblasti, tenascina C) e induttori di angiogenesi (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, trombospondina-1). Il confronto con la linea cellulare T98G rivela differenze nella morfologia e nell'espressione dei marcatori di superficie. Entrambe le linee cellulari mostrano un'elevata espressione di actina muscolare liscia a2. La variazione della concentrazione di siero fetale nel terreno di coltura influisce sulla percentuale di cellule che esprimono antigeni di superficie specifici, come CD73 e CD105.

Le linee cellulari A-172 e T98G rappresentano accuratamente i glioblastomi, fornendo strumenti preziosi per lo studio di questo tumore cerebrale. I loro profili di espressione genica e le caratteristiche morfologiche consentono di indagare sui meccanismi molecolari alla base dello sviluppo e della progressione del glioblastoma. I ricercatori possono utilizzare le cellule A-172 per approfondire la biologia del glioblastoma e potenzialmente identificare nuovi bersagli terapeutici per questa malattia devastante.

Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sito metastatico
Sede del tumore primario (cervello)
Applicazioni
Ricerca sul glioblastoma; biologia del GBM mesenchimale; studi sull’angiogenesi indotta da VEGF/FGF/TGF-β; invasione e migrazione del glioma; modellizzazione del GBM con IDH1 wild-type; test di sensibilità ai farmaci; modelli di xenotrapianto
Sinonimi
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Di tipo epiteliale (glioma)
Tipo di cellula
Cellule gliali
Stato di ploidia
Aneuploide
Stato MSI
Stabile (MSS)
Tempo di raddoppio
40 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
A172 (numero di catalogo Cytion 300108)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Non presenta mutazioni IDH1

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 darà luogo a un monostrato confluente entro 3 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 4 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24-48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
53 anni
Etnia
Caucasico