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Cellules A172
Tissu
Cerveau
Maladie
Glioblastome
Site métastatique
Localisation de la tumeur primaire (cerveau)
Synonymes
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

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Cellules A172

Cell line · Référence du produit 300108

La lignée cellulaire A-172 (A172 ou A-172 MG) est une lignée cellulaire importante utilisée dans la recherche en neurosciences. Elle provient du tissu cérébral d'un homme de 53 ans atteint d'un glioblastome...

€430.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

A-172 (A172 ou A-172 MG) est une lignée cellulaire importante utilisée dans la recherche en neurosciences. Elle provient du tissu cérébral d'un homme de 53 ans atteint d'un glioblastome, un type de cancer du cerveau. Ces cellules adhèrent et se répandent à la surface des boîtes de culture, avec un caryotype de n = 80 (80 chromosomes). Les cellules A-172 sont hypertriploïdes et présentent plus de 20 chromosomes marqueurs. Il a été démontré qu'elles n'étaient pas tumorigènes chez les souris NIH Swiss traitées au sérum anti-thymocytes. Les cellules A-172 ont un profil d'expression génique qui met en évidence leur lignage mésenchymateux et leur implication dans l'angiogenèse.

Elles expriment des gènes liés aux marqueurs mésenchymateux (CD90, CD105, protéine d'activation des fibroblastes, ténascine C) et aux inducteurs de l'angiogenèse (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, thrombospondine-1). Les comparaisons avec la lignée cellulaire T98G révèlent des différences dans la morphologie et l'expression des marqueurs de surface. Les deux lignées cellulaires présentent une forte expression de l'actine musculaire lisse a2. La modification de la concentration en sérum fœtal dans le milieu de culture affecte la proportion de cellules exprimant des antigènes de surface spécifiques, tels que CD73 et CD105.

Les lignées cellulaires A-172 et T98G représentent fidèlement les glioblastomes et constituent des outils précieux pour l'étude de cette tumeur cérébrale. Leurs profils d'expression génétique et leurs caractéristiques morphologiques permettent d'étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent le développement et la progression des glioblastomes. Les chercheurs peuvent utiliser les cellules A-172 pour mieux comprendre la biologie des glioblastomes et potentiellement identifier de nouvelles cibles thérapeutiques pour cette maladie dévastatrice.

Tissu
Cerveau
Maladie
Glioblastome
Site métastatique
Localisation de la tumeur primaire (cerveau)
Applications
Recherche sur le glioblastome ; biologie du GBM mésenchymateux ; études sur l'angiogenèse induite par le VEGF, le FGF et le TGF-β ; invasion et migration des gliomes ; modélisation du GBM de type sauvage IDH1 ; tests de sensibilité aux médicaments ; modèles de xénogreffes
Synonymes
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial (gliome)
Type de cellule
Cellules gliales
Statut de ploïdie
Aneuploïde
État du MSI
Stable (MSS)
Temps de doublement
40 heures

04Identifiants

Référence
A172 (numéro de catalogue Cytion 300108)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Expression et sensibilité

Profil mutationnel
Ne présente pas de mutation IDH1

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera lieu à une monocouche confluente en 3 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 4 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 à 48 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
53 ans
Origine ethnique
Caucasien