Gå direkte til indholdet
A172-celler
Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom
Metastasested
Primær tumorlokalisation (hjerne)
Synonymer
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Dokumenter

A172-celler

Cell line · Varenummer 300108

A-172 (A172 eller A-172 MG) er en vigtig cellelinje, der anvendes i neurovidenskabelig forskning. Den stammer fra hjernevæv fra en 53-årig mand med glioblas...

€430.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

A-172 (A172 eller A-172 MG) er en vigtig cellelinje, der bruges i neurovidenskabelig forskning. Den stammer fra hjernevæv fra en 53-årig mand med glioblastom, en type hjernekræft. Disse celler klæber og spreder sig på overfladen af dyrkningsskåle med en karyotype på n = 80 (80 kromosomer). A-172-celler er hypertriploide og har over 20 markørkromosomer. De har vist sig at være ikke-tumorogene i NIH Swiss-mus behandlet med anti-thymocyt-serum. A-172-celler har en genekspressionsprofil, der fremhæver deres mesenkymale afstamning og involvering i angiogenese.

De udtrykker gener relateret til mesenkymale markører (CD90, CD105, fibroblastaktiveringsprotein, tenascin C) og angiogenese-induktorer (VEGF, FGF2(b), TGFb1, thrombospondin-1). Sammenligninger med T98G-cellelinjen afslører forskelle i morfologi og ekspression af overflademarkører. Begge cellelinjer viser høj ekspression af a2 glat muskelaktin. Ændring af koncentrationen af føtalt serum i dyrkningsmediet påvirker andelen af celler, der udtrykker specifikke overfladeantigener, såsom CD73 og CD105.

A-172- og T98G-cellelinjerne repræsenterer glioblastomer nøjagtigt og giver værdifulde værktøjer til at studere denne hjernetumor. Deres genekspressionsprofiler og morfologiske træk gør det muligt at undersøge de molekylære mekanismer, der ligger til grund for udvikling og progression af glioblastomer. Forskere kan bruge A-172-celler til at få indsigt i glioblastomets biologi og potentielt identificere nye terapeutiske mål for denne ødelæggende sygdom.

Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom
Metastasested
Primær tumorlokalisation (hjerne)
Anvendelser
Forskning i glioblastom; biologi ved mesenkymalt GBM; undersøgelser af VEGF/FGF/TGF-β-angiogenese; invasion og migration af gliomer; modellering af GBM med IDH1-vildtype; analyser af lægemiddelfølsomhed; xenotransplantatmodeller
Synonymer
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epithel-lignende (gliom)
Celletype
Gliaceller
Ploidistatus
Aneuploid
MSI-status
Stabil (MSS)
Fordoblingstid
40 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A172 (Cytion katalognummer 300108)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Har ingen IDH1-mutation

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenhængende monolag inden for 3 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 4 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 til 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
53 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk