Mine otse sisu juurde
A172 Rakud
Kude
Aju
Haigus
Glioblastoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (aju)
Sünonüümid
A-172, A 172, A-172 MG, A-172MG

Dokumendid

A172 Rakud

Cell line · Toote number 300108

A-172 (A172 või A-172 MG) on neuroteaduse uuringutes kasutatav oluline rakuliin. See pärineb 53-aastase glioblastoomiga mehe ajukudedest...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A-172 (A172 või A-172 MG) on oluline rakuliin, mida kasutatakse neuroteaduslikes uuringutes. See pärineb 53-aastase glioblastoomi (üks ajuvähi tüüp) põdeva mehe ajukoes. Need rakud kleepuvad ja levivad kultuurnõu pinnal, nende karyotüüp on n = 80 (80 kromosoomi). A-172 rakud on hüpertriploidsed, millel on üle 20 markerkromosoomi. On näidatud, et nad ei ole tuumorigeensed tümotsüütide vastase seerumiga ravitud NIH Swiss hiirtel. A-172 rakkudel on geeniekspressiooniprofiil, mis rõhutab nende mesenhüümset päritolu ja osalemist angiogeneesis.

Nad ekspresseerivad mesenhümaalsete markerite (CD90, CD105, fibroblastide aktiveerimisvalk, tenascin C) ja angiogeneesi indutseerivate geenide (VEGF, FGF2(b), TGFb1, trombospondiin-1) geenid. Võrreldes T98G rakuliiniga ilmnevad erinevused morfoloogias ja pinnamarkerite ekspressioonis. Mõlemal rakuliinil on kõrge a2 silelihasaktiini ekspressioon. Loote seerumi kontsentratsiooni muutmine kasvukeskkonnas mõjutab spetsiifilisi pinnaantigeene, nagu CD73 ja CD105, ekspresseerivate rakkude osakaalu.

A-172 ja T98G rakuliinid esindavad täpselt glioblastoomi, pakkudes väärtuslikke vahendeid selle ajukasvaja uurimiseks. Nende geeniekspressiooniprofiilid ja morfoloogilised omadused võimaldavad uurida glioblastoomi arengu ja progresseerumise aluseks olevaid molekulaarseid mehhanisme. Teadlased saavad kasutada A-172 rakke, et saada teadmisi glioblastoomi bioloogiast ja potentsiaalselt leida uusi ravieesmärke selle laastava haiguse raviks.

Kude
Aju
Haigus
Glioblastoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (aju)
Rakendused
Glioblastoomi uurimine; mesenküümse GBM bioloogia; VEGF/FGF/TGF-β angiogeneesi uuringud; glioomi invasiivsus ja migratsioon; IDH1-tüüpi GBM modelleerimine; ravimite tundlikkuse testid; ksenotransplantaadi mudelid
Sünonüümid
  • A-172
  • A 172
  • A-172 MG
  • A-172MG

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype GBM line with IDH1 wild-type status and MSS phenotype
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadne (glioom)
Rakutüüp
Glial rakud
Ploidsus
Aneuploidne
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Kahekordistumisaeg
40 tundi

04Tunnused

Viide
A172 (Cytioni katalooginumber 300108)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0131

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Ei ole IDH1 mutatsiooni

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 3 päeva jooksul konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 4 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24–48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia