Células A172

A-172 (A172 ou A-172 MG) é uma importante linha celular utilizada em pesquisas na área de neurociência. Ela tem origem no tecido cerebral de um homem de 53 anos com glioblastoma, um tipo de câncer cerebral. Essas células aderem e se proliferam na superfície de placas de cultura, apresentando um cariótipo de n = 80 (80 cromossomos). As células A-172 são hipertriploides, apresentando mais de 20 cromossomos marcadores. Demonstrou-se que elas não são tumorigênicas em camundongos NIH Swiss tratados com soro antitimócito. As células A-172 apresentam um perfil de expressão gênica que destaca sua linhagem mesenquimal e seu envolvimento na angiogênese.

Elas expressam genes relacionados a marcadores mesenquimais (CD90, CD105, proteína de ativação de fibroblastos, tenascina C) e indutores de angiogênese (VEGF, FGF2 (b), TGFb1, trombospondina-1). Comparações com a linhagem celular T98G revelam diferenças na morfologia e na expressão de marcadores de superfície. Ambas as linhagens celulares apresentam alta expressão de actina alfa-2 do músculo liso. A alteração da concentração de soro fetal no meio de cultura afeta a proporção de células que expressam antígenos de superfície específicos, como CD73 e CD105.

As linhagens celulares A-172 e T98G representam com precisão os glioblastomas, fornecendo ferramentas valiosas para o estudo desse tumor cerebral. Seus perfis de expressão gênica e características morfológicas permitem investigações sobre os mecanismos moleculares subjacentes ao desenvolvimento e à progressão do glioblastoma. Os pesquisadores podem utilizar as células A-172 para obter insights sobre a biologia do glioblastoma e, potencialmente, identificar novos alvos terapêuticos para essa doença devastadora.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.